(成都)為了探討前列腺特異性膜抗原(PSMA)啟動(dòng)子和增強(qiáng)子調(diào)控目的基因表達(dá)的前列腺細(xì)胞特異性,了解增強(qiáng)子增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄效率的能力。研究者采用PCR方法從前列腺癌細(xì)胞DNA中分別擴(kuò)增PSMA啟動(dòng)子和增強(qiáng)子序列,先后克隆到含有報(bào)告基因綠色熒光蛋白(GFP)的質(zhì)粒載體,脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染不同癌細(xì)胞并觀察GFP在不同細(xì)胞的表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建質(zhì)粒pEGFP-PS-MAPro和pEGFP-PSMAEP,轉(zhuǎn)染結(jié)果顯示PSMA表達(dá)陽(yáng)性的LNCaP細(xì)胞中存在GFP的有效表達(dá),且pEGFP-PSMAEP的調(diào)控轉(zhuǎn)錄能力較pEGFP-PSMAPro強(qiáng)20倍。可見PSMA啟動(dòng)子增強(qiáng)子調(diào)控GFP表達(dá)的重組質(zhì)粒的構(gòu)建證明該調(diào)控序列具有前列腺細(xì)胞特異性,增強(qiáng)子能夠明顯增強(qiáng)啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄效率,增加了目的基因的表達(dá)水平。PSMA啟動(dòng)子和增強(qiáng)子的共調(diào)控可以保證基因表達(dá)的強(qiáng)度和細(xì)胞特異性,為前列腺癌基因靶向性治療研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
/**/