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前列腺特異性膜抗原啟動子增強子調(diào)控重組質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定 【?2006-01-17 發(fā)布?】 臨床報道
(成都)為了探討前列腺特異性膜抗原(PSMA)啟動子和增強子調(diào)控目的基因表達的前列腺細胞特異性,了解增強子增強轉(zhuǎn)錄效率的能力。研究者采用PCR方法從前列腺癌細胞DNA中分別擴增PSMA啟動子和增強子序列,先后克隆到含有報告基因綠色熒光蛋白(GFP)的質(zhì)粒載體,脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染不同癌細胞并觀察GFP在不同細胞的表達情況。結(jié)果成功構(gòu)建質(zhì)粒pEGFP-PS-MAPro和pEGFP-PSMAEP,轉(zhuǎn)染結(jié)果顯示PSMA表達陽性的LNCaP細胞中存在GFP的有效表達,且pEGFP-PSMAEP的調(diào)控轉(zhuǎn)錄能力較pEGFP-PSMAPro強20倍??梢奝SMA啟動子增強子調(diào)控GFP表達的重組質(zhì)粒的構(gòu)建證明該調(diào)控序列具有前列腺細胞特異性,增強子能夠明顯增強啟動子的轉(zhuǎn)錄效率,增加了目的基因的表達水平。PSMA啟動子和增強子的共調(diào)控可以保證基因表達的強度和細胞特異性,為前列腺癌基因靶向性治療研究提供實驗依據(jù)。
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