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我學者首次發現抗HBV末端蛋白雜交瘤細胞系 【?2006-02-25 發布?】 臨床報道
日前,第四軍醫大學基礎部免疫學教研室趙玉紅實驗師等,采用經原核表達的乙肝病毒末端蛋白(HBV-TP)免疫BALB/c小鼠,通過取其脾細胞與骨髓瘤細胞SPS2/0融合克隆,從而成功地獲得被命名為E3mAb、F5mAb和F7mAb并具有穩定分泌抗體的抗HBV末端蛋白雜交瘤細胞系。該雜交瘤細胞系的成功建立,為研究HBV感染的早期診斷及乙肝患者的生物治療有著重要意義。 據介紹,乙肝是由HBV感染所引起的全球性傳染疾病。該病易于慢性化,并與肝癌的發生發展密切相關。近年來國際興起的PCR檢測新技術,因有某些局限性而不能作為病毒感染的早期指標。因此,研究HBV多聚酶mAb在HBV相關肝臟疾病診斷中的應用,建立抗HBV末端蛋白雜交瘤細胞系,以尋找HBV感染的最佳臨床治療方法,是目前國內外關注的熱點和最活躍的新思路。 研究人員采用經原核表達的HBV-TP免疫BALB/c小鼠,并通過取其脾細胞與骨髓瘤細胞SP2/0融合,接種培養。在進行篩選和克隆化的基礎上,應用ELISA法檢測出8個陽性克隆,經進一步擴大培養和反復克隆后,終于從這8個陽性克隆中精確地篩選出了陽性率達100%的3個克隆細胞(即雜交瘤細胞系)。這3株雜交瘤細胞系在100天的連續培養中,其mAb的分泌持續穩定,凍存細胞復蘇后仍保持抗體分泌能力,其染色體數為99~116條,均有端著絲粒及標志染色體(中著絲粒染色體),DNA含量均高于SP2/0細胞,其分泌的mAb被分別命名為E3mAb、F5mAb和F7mAb。此外,此3株雜交瘤細胞系經免疫組化染色培養上清抗體效價為1誜100,腹水為1誜1000,其相應抗原在乙肝病毒及肝硬變組織中呈高表達(80%),而在正常肝組織中未見陽性反應,其抗原主要分布于細胞質內。提示該3株抗乙型肝炎病毒末端蛋白雜交瘤細胞分泌的mAb具有特異親合性,其mAb分泌穩定,特異性強。 據趙玉紅介紹,HBV-P0L抗原及抗體可在多數HBV感染患者血清中出現,尤其是它們可出現于其他HBV血清學指標陰性的HBV感染的個體血清中,提示這一指標在某些病例中可能是惟一反映HBV感染或體內HBV低水平復制的重要標記物。該研究所獲得的3株雜交瘤細胞系表明,阻斷HBV-P0L基因編碼的末端蛋白TP,對乙肝的防治具有重要的應用意義,為臨床對HBV-TP為靶蛋白的主動性免疫治療及基因治療奠定了基礎。 /**/
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