日前，第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部免疫學(xué)教研室趙玉紅實(shí)驗(yàn)師等，采用經(jīng)原核表達(dá)的乙肝病毒末端蛋白（HBV-TP）免疫BALB/c小鼠，通過取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞SPS2/0融合克隆，從而成功地獲得被命名為E3mAb、F5mAb和F7mAb并具有穩(wěn)定分泌抗體的抗HBV末端蛋白雜交瘤細(xì)胞系。該雜交瘤細(xì)胞系的成功建立，為研究HBV感染的早期診斷及乙肝患者的生物治療有著重要意義。

    據(jù)介紹，乙肝是由HBV感染所引起的全球性傳染疾病。該病易于慢性化，并與肝癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。近年來國際興起的PCR檢測新技術(shù)，因有某些局限性而不能作為病毒感染的早期指標(biāo)。因此，研究HBV多聚酶mAb在HBV相關(guān)肝臟疾病診斷中的應(yīng)用，建立抗HBV末端蛋白雜交瘤細(xì)胞系，以尋找HBV感染的最佳臨床治療方法，是目前國內(nèi)外關(guān)注的熱點(diǎn)和最活躍的新思路。

    研究人員采用經(jīng)原核表達(dá)的HBV-TP免疫BALB/c小鼠，并通過取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞SP2/0融合，接種培養(yǎng)。在進(jìn)行篩選和克隆化的基礎(chǔ)上，應(yīng)用ELISA法檢測出8個(gè)陽性克隆，經(jīng)進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)和反復(fù)克隆后，終于從這8個(gè)陽性克隆中精確地篩選出了陽性率達(dá)100%的3個(gè)克隆細(xì)胞（即雜交瘤細(xì)胞系）。這3株雜交瘤細(xì)胞系在100天的連續(xù)培養(yǎng)中，其mAb的分泌持續(xù)穩(wěn)定，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后仍保持抗體分泌能力，其染色體數(shù)為99~116條，均有端著絲粒及標(biāo)志染色體（中著絲粒染色體），DNA含量均高于SP2/0細(xì)胞，其分泌的mAb被分別命名為E3mAb、F5mAb和F7mAb。此外，此3株雜交瘤細(xì)胞系經(jīng)免疫組化染色培養(yǎng)上清抗體效價(jià)為1誜100，腹水為1誜1000，其相應(yīng)抗原在乙肝病毒及肝硬變組織中呈高表達(dá)（80%），而在正常肝組織中未見陽性反應(yīng)，其抗原主要分布于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。提示該3株抗乙型肝炎病毒末端蛋白雜交瘤細(xì)胞分泌的mAb具有特異親合性，其mAb分泌穩(wěn)定，特異性強(qiáng)。

    據(jù)趙玉紅介紹，HBV-P0L抗原及抗體可在多數(shù)HBV感染患者血清中出現(xiàn)，尤其是它們可出現(xiàn)于其他HBV血清學(xué)指標(biāo)陰性的HBV感染的個(gè)體血清中，提示這一指標(biāo)在某些病例中可能是惟一反映HBV感染或體內(nèi)HBV低水平復(fù)制的重要標(biāo)記物。該研究所獲得的3株雜交瘤細(xì)胞系表明，阻斷HBV-P0L基因編碼的末端蛋白TP，對乙肝的防治具有重要的應(yīng)用意義，為臨床對HBV-TP為靶蛋白的主動(dòng)性免疫治療及基因治療奠定了基礎(chǔ)。