（長沙）為了應用陽離子脂質體介導含有大鼠胰腺十二指腸同源框-1(PDX-1)基因的真核表達載體轉染胰腺導管上皮細胞。研究者利用逆轉錄聚合酶鏈反應技術克隆大鼠PDX-1基因，酶切后插入經(jīng)相同酶切及磷酸化處理的含綠色熒光蛋白(GFP)的空白載體pEGFP-C2，構成重組質粒，再進行HindⅢ、BglⅡ雙酶切篩選、鑒定并測序；陽離子脂質體介導轉染后，熒光顯微鏡下觀察熒光并計算轉染效率從而對轉染條件進行優(yōu)化。結果限制性酶切分析證實重組后的載體成功載入PDX-1基因；克隆的目的片斷經(jīng)序列測定與Genebank公布的序列一致；轉染條件優(yōu)化后重組載體在胰腺導管上皮細胞中有效表達。可見在國內首次成功克隆了大鼠PDX-1基因，并構建了含有PDX-1基因的真核表達載體；通過優(yōu)化轉染條件提高了轉染效率， 為將表達PDX-1基因的胰腺導管上皮細胞作為組織工程的種子細胞提供了實驗依據(jù)。 /**/