（南京）為了研究轉化生長因子β1(TGF-β)誘導人腎小管上皮細胞(HKC)轉分化作用與其細胞內信號傳遞途徑的關系。研究者以細胞間粘連蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)作為腎小管上皮細胞轉分化的觀察指標，借助細胞培養(yǎng)、蛋白印跡和基因轉染等方法，檢測TGF-β1引發(fā)的Smad信號途徑的變化，和TGF-β1誘導的腎小管上皮細胞轉分化作用。將含有Smad 7基因表達質粒轉染HKC細胞，觀察高表達的Smad 7蛋白對TGF-β1作用的影響。結果實驗結果表明①TGF-β1作用HKC細胞10 min即可磷酸化HKC細胞內Smad2/3蛋白，而且此作用可持續(xù)48h以上；②TGF-β1作用HKC細胞6h即可下調E-cadherin蛋白的表達，24h后能誘導該細胞表達α-SMA，其作用呈明顯的劑量依賴關系；③轉染Smad7表達質粒的HKC細胞，可拮抗TGF-β1誘導HKC細胞表達α-SMA以及下調E-cadherin蛋白表達的作用；④應用特異性MAP激酶抑制劑(PD98059和SC68376)和PI3激酶抑制劑(Wortmannin)均不能拮抗TGF-β1的作用。可見TGF-β1誘導的上皮細胞轉分化作用是依賴其引發(fā)的Smad信號途徑，阻斷該信號傳遞途徑則能夠拮抗TGF-β1的作用。/**/