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西安交大研發(fā)成功HCV抗體蛋白芯片檢測(cè)新技術(shù) 【?2006-04-14 發(fā)布?】 臨床報(bào)道
近日,西安交通大學(xué)第二醫(yī)院檢驗(yàn)科何謙博士等在一項(xiàng)陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目基金課題研究中,成功研發(fā)出丙型肝炎病毒(HCV)不同片段抗體蛋白芯片檢測(cè)新技術(shù)。該技術(shù)的問(wèn)世,為丙型肝炎患者的確診、獻(xiàn)血人員的篩選及治療藥物的研發(fā)等,提供了先進(jìn)的檢測(cè)手段。 據(jù)介紹,近年來(lái),國(guó)內(nèi)外對(duì)HCV的檢測(cè)技術(shù)已越來(lái)越先進(jìn),如應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、基因芯片等。目前,美國(guó)已采用RIBA3.0試劑檢測(cè)技術(shù)。因此,研發(fā)HCV抗體蛋白芯片檢測(cè)技術(shù),已成為科研人員關(guān)注的熱點(diǎn)。 蛋白芯片檢測(cè)技術(shù)是伴隨基因芯片發(fā)展起來(lái)的新技術(shù),它是將蛋白質(zhì)的分析微縮到小型芯片上,利用熒光或酶顯色進(jìn)行檢測(cè),并通過(guò)電腦程序分析從而得出準(zhǔn)確結(jié)果。研制中,何謙博士等首先獲取HCV融合抗原及分片段抗原,點(diǎn)樣于醛基化玻片上,制成HCV不同片段抗體蛋白芯片,通過(guò)重復(fù)性、穩(wěn)定性、特異性試驗(yàn)及抗-HCV的ELISA試劑法和目前國(guó)際最先進(jìn)的RIBA試劑法對(duì)比,觀察評(píng)估蛋白芯片的檢測(cè)率和準(zhǔn)確率。 結(jié)果發(fā)現(xiàn),對(duì)20例陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)和穩(wěn)定性試驗(yàn)檢測(cè),新鮮包被的蛋白芯片與正常對(duì)照組結(jié)果一致;對(duì)20份類風(fēng)濕因子陽(yáng)性血清標(biāo)本進(jìn)行特異性試驗(yàn),陰性率達(dá)100%。同時(shí)還發(fā)現(xiàn),經(jīng)對(duì)99例蛋白芯片的融和抗原檢測(cè),其與國(guó)內(nèi)ELISA試劑法相比,陰性符合率為93.8%,陽(yáng)性符合率為97.1%;蛋白芯片分片段檢測(cè)與國(guó)際RIBA試劑法相比,其陽(yáng)性符合率為98.5%,陰性符合率為100%。提示蛋白芯片法與ELISA、RIBA試劑法檢測(cè)結(jié)果相比,不僅有良好的一致性(P<0.05),而且優(yōu)于其他兩種檢測(cè)方法。 另?yè)?jù)研究人員介紹,在HCV檢測(cè)中,加強(qiáng)和擴(kuò)大對(duì)HCV不同編碼區(qū)的抗體檢測(cè),是近年來(lái)該領(lǐng)域研究的一個(gè)新熱點(diǎn),它直接關(guān)系到檢測(cè)技術(shù)的準(zhǔn)確率和應(yīng)用率。因編碼區(qū)含混合抗原,由于不同抗原組合時(shí),抗原片段濃度不同,造成抗原配伍不適合或抗原相互干擾,從而影響抗原簇位點(diǎn)的充分暴露,造成漏檢現(xiàn)象。本研究表明,蛋白芯片檢測(cè)與其他肝炎病毒抗體無(wú)交叉反應(yīng),可降低假陽(yáng)性發(fā)生,試劑穩(wěn)定性可達(dá)1年,在抗體檢測(cè)、疾病診斷及藥物研發(fā)中,均顯示出快速、高效、高通量信息處理等優(yōu)勢(shì)和良好的應(yīng)用前景。 /**/
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