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西安交大研發成功HCV抗體蛋白芯片檢測新技術

【?2006-04-14 發布?】 臨床報道  

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    近日,西安交通大學第二醫院檢驗科何謙博士等在一項陜西省科學技術研究發展計劃項目基金課題研究中,成功研發出丙型肝炎病毒(HCV)不同片段抗體蛋白芯片檢測新技術。該技術的問世,為丙型肝炎患者的確診、獻血人員的篩選及治療藥物的研發等,提供了先進的檢測手段。

    據介紹,近年來,國內外對HCV的檢測技術已越來越先進,如應用聚合酶鏈反應(PCR)、基因芯片等。目前,美國已采用RIBA3.0試劑檢測技術。因此,研發HCV抗體蛋白芯片檢測技術,已成為科研人員關注的熱點。

    蛋白芯片檢測技術是伴隨基因芯片發展起來的新技術,它是將蛋白質的分析微縮到小型芯片上,利用熒光或酶顯色進行檢測,并通過電腦程序分析從而得出準確結果。研制中,何謙博士等首先獲取HCV融合抗原及分片段抗原,點樣于醛基化玻片上,制成HCV不同片段抗體蛋白芯片,通過重復性、穩定性、特異性試驗及抗-HCV的ELISA試劑法和目前國際最先進的RIBA試劑法對比,觀察評估蛋白芯片的檢測率和準確率。

    結果發現,對20例陽性標本進行重復和穩定性試驗檢測,新鮮包被的蛋白芯片與正常對照組結果一致;對20份類風濕因子陽性血清標本進行特異性試驗,陰性率達100%。同時還發現,經對99例蛋白芯片的融和抗原檢測,其與國內ELISA試劑法相比,陰性符合率為93.8%,陽性符合率為97.1%;蛋白芯片分片段檢測與國際RIBA試劑法相比,其陽性符合率為98.5%,陰性符合率為100%。提示蛋白芯片法與ELISA、RIBA試劑法檢測結果相比,不僅有良好的一致性(P<0.05),而且優于其他兩種檢測方法。

    另據研究人員介紹,在HCV檢測中,加強和擴大對HCV不同編碼區的抗體檢測,是近年來該領域研究的一個新熱點,它直接關系到檢測技術的準確率和應用率。因編碼區含混合抗原,由于不同抗原組合時,抗原片段濃度不同,造成抗原配伍不適合或抗原相互干擾,從而影響抗原簇位點的充分暴露,造成漏檢現象。本研究表明,蛋白芯片檢測與其他肝炎病毒抗體無交叉反應,可降低假陽性發生,試劑穩定性可達1年,在抗體檢測、疾病診斷及藥物研發中,均顯示出快速、高效、高通量信息處理等優勢和良好的應用前景。

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