(南充)為了將含人凝血酶調節蛋白(hTM)基因的真核表達載體質粒pcDNA3.1/hTM轉染體外培養的臍靜脈內皮細胞(HUVECs),觀察外源凝血酶調節蛋白的表達及其所致的HUVECs抗凝功能的改變。研究者由陽離子脂質體介導將pcDNA3.1/hTM質粒轉入內皮細胞中,半定量RT-PCR測定各組hTM mRNA的表達強度,免疫組化法檢測hTM在內皮細胞膜上的表達;測定各組內皮細胞對蛋白C(PC)的激活;半自動凝血儀測定內皮細胞-PC反應液對正常血漿活化部分凝血活酶時間(APTT)和凝血酶原時間(PT)的影響。結果HUVECs pcDNA3.1/hTM質粒轉染率約為10%,TM mRNA和TM蛋白的表達強度都有明顯提高.重組質粒轉染組、空載質粒組及未轉染組PC反應液中活化蛋白C(activated protein C,APC)的含量分別是(2.80±0.43)μg/ml、(0.75±0.08)μg/ml、(0.85±0.11)μg/ml.APTT值在重組質粒轉染組、空載質粒組、未轉染組、未激活PC組和正常對照組中分別為(51.68±2.73)s、(38.38±2.44)s、(39.65±2.39)s、(33.93±1.73)s和(34.60±1.86)s。PT值在各組中分別為(21.89±1.66)s、(20.56±1.74)s、(20.42±2.04)s、(19.57±1.36)s和(20.16±1.35)s。可見pcDNA3.1/hTM質粒能被導入內皮細胞中,表達的TM分子具有生物學活性,能明顯提高對PC的激活.激活的PC能明顯抑制血漿內源性凝血途徑使APTT延長,也使外源性凝血途徑受到輕度抑制。 /**/