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In-cell PCR技術擴增白癜風自身抗體基因

【?2006-06-10 發布?】 臨床報道  

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    (西安)為了從白癜風患者外周血B淋巴細胞中擴增獲得原始親本配對的抗體基因。研究者以正常人的黑素細胞為抗原,用活細胞ELISA法篩選50例白癜風血清,選擇其中7例抗黑素細胞膜抗體強陽性的患者外周血分離得到CD19+B淋巴細胞,以10%甲醛溶液固定,蛋白酶K溶液通透化處理,進行in-cell PCR。用特異性引物進行in-cell RT-PCR擴增人免疫球蛋白輕鏈和重鏈可變區基因,采用Cre/loxP系統在細胞內完成輕重鏈的連接,然后經巢式PCR擴增獲得具有細胞內原始親本配對特性的單鏈抗體基因。結果經in-cell PCR擴增,獲得了與預期單鏈抗體大小一致的單一800 bp產物。可見利用in-cell PCR技術可以擴增白癜風原始親本配對的自身抗體基因。/**/
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