湖北華中科技大學同濟醫學院高峰博士等在近日完成的一項國家自然科學基金課題中發現，增強型綠色熒光蛋白（eGFP）基因可高效轉染入永生化大鼠神經前體細胞，并可在細胞中長期穩定的表達和移植。這一研究結果，為eGFP作為良好的示蹤標記用于體內移植的研究奠定了堅實基礎。

    近年來研究表明，將體外培養的神經前體細胞（NPC）進行體內移植，有望成為神經系統疾病的治療手段。然而，NPC作為細胞載體攜帶目的基因移植入人體后，如何在特定的微環境誘導下存活、分裂以至形態分化為與周圍宿主細胞相似的細胞等，已成為目前NPC移植研究領域的熱點。

    為探討NPC移植的新思路，高峰博士等研究人員采用體外培養基因轉染方法，將重組腺相關病毒（rAAV）載體介導的eGFP基因，轉染入大鼠永生化神經前體細胞（INPC）內，通過傳代培養、基因轉染、抗體鑒定等系列技術處理后，在熒光顯微鏡下觀察檢測eGFP在INPC中的表達情況。

    結果發現：轉染24小時，神經前體細胞出現綠色熒光蛋白表達，72小時轉染率達90%，傳代培養8周后，表達綠色熒光蛋白的陽性細胞仍高達70%~75%，細胞生長特性無明顯改變。免疫細胞化學檢測結果顯示，轉染的綠色熒光蛋白神經前體細胞抗體抗原染色均為陽性，其在培養基胎牛血清誘導下，可分化為神經元和星形膠質細胞。提示攜帶eGFP基因可在NPC中長期持續穩定表達，并可作為細胞示蹤標記，以觀察細胞的增殖、分化等特性。

    據指導該研究的田玉科教授介紹，NPC是一類可分裂增殖、自我更新并具有多分化潛能的細胞，可作為神經細胞的種子細胞，在細胞移植治療和細胞介導的基因治療中，具有潛在的臨床應用價值。而eGFP是一種優化的突變型綠色熒光蛋白，其熒光比野生型強35倍，具有結構穩定、高效表達、無種系依賴性等特點，更適用于細胞基因表達和蛋白定位檢測及細胞示蹤標記。本研究表明，eGFP的重組腺相關病毒載體，可高效轉染入NPC，并保持了NPC的基本特性。因此，可將eGFP作為一種良好的細胞示蹤劑，進行NPC在體內移植的研究。