（南京）為了研究一種變異的流感病毒非結構蛋白(NS1)對干擾素調節因子3(IRF-3)抑制作用的影響。研究者用A/FM/1/47、A/HK/1/68、A/HK/1/68-MA20、A/HK/1/68-MA20C和陽性對照Sendai病毒(SV)感染HEK293細胞，Western blot比較這些病毒感染后磷酸化的遷移較慢的IRF-3Ⅲ和Ⅳ型是否出現.亞克隆A/HK/1/68的野生型NS1和A/HK/1/68-MA20的變異型NS1至pcDNA3.1-flag構建flag-NS1野生型，flag-NS1變異型質粒，分別用兩種質粒轉染HEK293細胞，轉染后16 h，感染SV 8 h，然后收集細胞，作Western印跡分析，用抗flag抗體鑒定野生型和變異型NS1的表達，用抗IRF-3抗體觀測NS1對SV活化IRF-3的抑制作用，用熒光素酶功能分析的方法觀測兩種NS1對SV誘導的干擾素β啟動子-pGL-2B熒光素酶活性的影響。結果感染的5種病毒中僅毒性較低的A/HK/1/68-MA20和陽性對照SV能使IRF-3磷酸化，感染MA20后9 h開始有IRF-3磷酸化，23 h和26 h最強，比較A/HK/1/68和A/HK/1/68-MA20的NS1序列，發現從cDNA起始的第94位核苷酸由T變成C，蛋白質的第23位由纈氨酸變成丙氨酸。NS1野生型和變異型均有高表達。可見 A/HK/1/68-MA20的NS1的點變異可導致失去野生型NS1的抑制干擾素β啟動子活性的作用。 /**/