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反向斑點雜交技術檢測泌尿生殖道沙眼衣原體及基因分型 【?2006-10-12 發布?】 臨床報道
(廣州)為了建立反向斑點雜交技術,對泌尿生殖道沙眼衣原體感染進行檢測和基因分型。研究者用0ligo軟件設計寡核苷酸探針,采用巢式聚合酶鏈反應(PCR)擴增ompl基因的VS1-VS2序列,反向斑點雜交技術對沙眼衣原體進行檢測和基因分型。結果巢式PCR擴增ompl基因的VS1-VS2序列的敏感性與質粒PCR符合率為98.2%(56/57)。優選出11條型特異性(A、B+Ba、C、D、E、F、G、H、I、J和K)和3條群特異性寡核苷酸探針:B群(B、Ba、D和E型),C群(A、C、H、I、J和K型)和中間群(F和G型)。特異性經過基因庫中的BLAST程序比較和試驗優化,結果顯示各探針均與標準株呈特異性雜交。56例VS1-VS2 PCR陽性的臨床標本雜交法檢測均陽性,共檢出59株沙眼衣原體,包括8個基因型,其中以E、F、D和H型為主,占77.9%,分別為25.4%,22.0%,16.9%和13.6%。發現3例混合感染占5.4%,分別為D/E、D/F和F/K。可見反向斑點雜交技術簡便且快速,可直接對臨床標本沙眼衣原體進行檢測和基因分型。 /**/
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