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成年大鼠骨髓多能成體祖細胞的克隆化培養及其鑒定

【?2006-10-18 發布?】 臨床報道  

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    (上海)為了優化培養條件,獲得體外克隆化培養的成年大鼠骨髓多能成體祖細胞(rMAPC),并對其進行表型分析及分化潛能鑒定。研究者選擇低血清條件培養基全骨髓直接貼壁法初步分離大鼠骨髓干細胞,用極限稀釋法進行克隆化培養,用流式細胞術及免疫細胞化學法對克隆化培養的rMAPC進行表型分析,并進行體外成脂肪、成骨及成神經細胞誘導,RT-PCR檢測Oct 4及三個胚層早期標志物,確定其表型及分化潛能。結果單個細胞來源rMAPC在體外擴增至20代仍保持良好的生長狀態;流式細胞術及細胞免疫組化檢測結果顯示CD71、α-SMA及Vimentin表達陽性;CD34、CD44、CD45表達陰性;細胞周期分析顯示S+G2+M期細胞約占17%,而處于G0/G1期的細胞占83%;rMAPC體外可被誘導向脂肪細胞、骨細胞及神經細胞分化;RT-PCR檢測到Oct 4及三個胚層早期標志物的表達。可見體外克隆化培養的rMAPC能維持良好的干細胞生物學特性。 /**/
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