（上海）為了優(yōu)化培養(yǎng)條件，獲得體外克隆化培養(yǎng)的成年大鼠骨髓多能成體祖細胞(rMAPC)，并對其進行表型分析及分化潛能鑒定。研究者選擇低血清條件培養(yǎng)基全骨髓直接貼壁法初步分離大鼠骨髓干細胞，用極限稀釋法進行克隆化培養(yǎng),用流式細胞術(shù)及免疫細胞化學法對克隆化培養(yǎng)的rMAPC進行表型分析，并進行體外成脂肪、成骨及成神經(jīng)細胞誘導，RT-PCR檢測Oct 4及三個胚層早期標志物，確定其表型及分化潛能。結(jié)果單個細胞來源rMAPC在體外擴增至20代仍保持良好的生長狀態(tài)；流式細胞術(shù)及細胞免疫組化檢測結(jié)果顯示CD71、α-SMA及Vimentin表達陽性；CD34、CD44、CD45表達陰性；細胞周期分析顯示S+G2+M期細胞約占17%，而處于G0/G1期的細胞占83%；rMAPC體外可被誘導向脂肪細胞、骨細胞及神經(jīng)細胞分化；RT-PCR檢測到Oct 4及三個胚層早期標志物的表達。可見體外克隆化培養(yǎng)的rMAPC能維持良好的干細胞生物學特性。 /**/