細胞內(nèi)鈣和cAMP是調(diào)節(jié)腎素釋放的第二信使，cAMP通過腎小球旁(JG)細胞刺激腎素釋放，而增高的細胞內(nèi)鈣可以抑制該效應(yīng)。研究人員假定，通過激活腺苷酸環(huán)化酶的鈣抑制亞型、增高cAMP和刺激腎素釋放可以減低細胞內(nèi)鈣，為證實這一設(shè)想，研究者從C-57/B6小鼠原代培養(yǎng)JG細胞，當細胞在無血清培養(yǎng)基中生長至密度為70%，存在或不存在100 micromol/L 胞質(zhì)鈣螯合劑5'5-二甲基-1,2-二-(2-氨基苯氧基)-乙烷-N,N,N',N'-四-乙酸(BAPTA-AM)孵育2小時，以減低細胞內(nèi)鈣，采用放射免疫測定法確定JG 細胞cAMP含量和腎素釋放。可見細胞內(nèi)cAMP含量為4.04+/-0.92 pM/mL每毫克蛋白，BAPTA-AM孵育后增加by125+/-33% (P<0.01)。基線腎素為1.28+/-0.40 mg血管緊張素I每升每小時每毫克蛋白，BAPTA-AM可使其增加182+/-62% (P<0.025)。采用抗體進行蛋白印記法識別V 和VI型腺苷酸環(huán)化酶，發(fā)現(xiàn)約為135 kDa的特異的環(huán)帶。當檢驗原代培養(yǎng)分離的JG細胞中的腺苷酸環(huán)化酶的鈣抑制亞型，顯示局部較強的胞質(zhì)染色。針對腎素和腺苷酸環(huán)化酶V/VI型細胞染色顯示細胞質(zhì)內(nèi)共區(qū)域化。腺苷酸環(huán)化酶抑制劑(SQ 22,536)完全阻斷BAPTA-AM-刺激的腎素釋放和JG 細胞內(nèi)cAMP含量。因此，腺苷酸環(huán)化酶的鈣抑制亞型存在于JG細胞內(nèi)。因此，細胞內(nèi)鈣減低可以刺激腺苷酸環(huán)化酶，導(dǎo)致cAMP合成以及腎素釋放。 /**/