（烏魯木齊）為了構建人類8型皰疹病毒(HHV-8)基因開放讀碼框(ORF)73C重組原核表達質粒并誘導表達，獲得HHV-8潛伏態相關核抗原重組蛋白，并對其免疫活性進行初步鑒定。研究者 軟件設計引物，分別在引物兩端添加特異的酶切位點，以pGEM-Teasy/ORF73質粒為模板，聚合酶鏈反應(PCR)擴增ORF73C基因序列，克隆入原核表達載體pET-28a(+)，構建原核表達質粒pET28a-ORF73C；轉化E.coli DH5α，經酶切、測序鑒定其插入序列的正確性，轉入E.coli BL21(DE3)，并誘導表達，以多聚組氨酸親合層析柱純化，凝膠蛋白電泳、Western印跡方法行表達蛋白的分析和抗原特異性免疫鑒定。結果 測序結果表明構建的pET28a-ORF73C原核表達質粒連接正確，插入的ORF73C基因片段為453 bp。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)表明ORF73C基因成功表達，在相對分子質量20 000處有表達條帶Western印跡分析顯示重組蛋白能被卡波濟肉瘤患者陽性血清識別，具有良好的抗原性。可見 成功構建了pET28a-ORF73C原核表達質粒，獲得的純化HHV-8潛伏態相關核抗原蛋白與卡波濟肉瘤患者血清具有特異性識別，顯示其作為檢測抗原的可能，但其敏感性和特異性則有待進一步的驗證。/**/