此研究目的是檢測(cè)HBV對(duì)胎盤、胎肝和滋養(yǎng)層細(xì)胞的感染情況,探討HBV的宮內(nèi)感染機(jī)制。采用的方法是研究對(duì)象包括20例孕婦胎盤組織、6例引產(chǎn)胎兒胎肝組織及體外培養(yǎng)的胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞。ELISA法檢測(cè)孕婦外周血、胎兒臍血和6個(gè)月嬰兒外周血HBV標(biāo)志物;熒光定量PCR法檢測(cè)血清和滋養(yǎng)層細(xì)胞中的HBV DNA;免疫組織化學(xué)法和免疫熒光法檢測(cè)胎盤、胎肝組織及滋養(yǎng)層細(xì)胞中HBV標(biāo)志物的表達(dá);末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)胎盤和滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡情況。研究結(jié)果是孕婦血清HBV DNA水平與胎兒臍血HBV DNA水平相關(guān),臍血HBV DNA陽(yáng)性者其母血HBV DNA〉1.0×10^7拷貝/mL;6例胎盤組織和3例引產(chǎn)胎兒胎肝組織中可見HBsAg免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性細(xì)胞,其中1例胎肝組織中發(fā)現(xiàn)HBcAg陽(yáng)性細(xì)胞;體外培養(yǎng)滋養(yǎng)層細(xì)胞與HBV DNA陽(yáng)性血清共孵育后,可檢測(cè)到HBsAg的表達(dá),亦可檢測(cè)到HBV DNA。體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)均檢測(cè)到HBV感染后滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡呈增加趨勢(shì),且胎盤細(xì)胞的凋亡與臍血HBV DNA水平相關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,隨感染時(shí)間的延長(zhǎng),滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡呈增加趨勢(shì)。6個(gè)月后,12例新生兒有1例血清HBsAg、HBeAg和抗-HBc陽(yáng)性,6例抗-HBs陽(yáng)性。所得出的結(jié)論,HBV宮內(nèi)感染的機(jī)制可能是通過HBV感染胎盤屏障而使胎兒發(fā)生HBV宮內(nèi)感染。HBV在胎兒組織器官內(nèi)的定位和復(fù)制可能是新生兒發(fā)生慢性HBV感染的重要因素。滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡可能是胎盤屏障阻斷HBV宮內(nèi)傳播的一種保護(hù)性機(jī)制。/**/