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苦參堿處理的K562細(xì)胞中IER3IP1基因表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞增

【?2008-08-25 發(fā)布?】 臨床報(bào)道  

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    該項(xiàng)研究目的是研究苦參堿誘導(dǎo)K562細(xì)胞分化過程中IER3IP1基因的表達(dá),以明確IER3IP1基因表達(dá)與苦參堿作用的量效及時(shí)效關(guān)系,并初步探討該基因在K562細(xì)胞中的功能。

    方法采用錐蟲藍(lán)染色分析苦參堿對(duì)K562細(xì)胞的生長抑制作用;用RT―PCR半定量方法觀察K562細(xì)胞在不同時(shí)間、不同劑量苦參堿作用下IER3IP1基因的表達(dá)情況;對(duì)IER3IP1基因重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的K562細(xì)胞(K562/eYFP―IER3IP1)作細(xì)胞形態(tài)學(xué)及細(xì)胞增殖變化的觀察,同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞周期檢測(cè)以及超微結(jié)構(gòu)觀察。結(jié)果苦參堿對(duì)K562細(xì)胞有增殖抑制作用,在苦參堿作用3h后IER3IP1基因表達(dá)可升高3―4倍,并呈劑量依賴性,其后6~48h表達(dá)下降,低于非苦參堿處理組。K562/eYFP―IER3IP1細(xì)胞的增殖速度顯著減緩,G0/G1期細(xì)胞數(shù)升高(P〈0.05);且苦參堿作用24h后在光鏡和電鏡下均可見紅系分化細(xì)胞增多。由此得出結(jié)論苦參堿抑制K562細(xì)胞生長,同時(shí)使IER3IP1基因表達(dá)以劑量依賴的方式瞬時(shí)升高,轉(zhuǎn)染了IER3IP1基因的K562細(xì)胞對(duì)苦參堿敏感性增高,提示該基因可能參與了苦參堿作用于K562細(xì)胞的早期反應(yīng),并在后續(xù)的紅系分化中發(fā)揮作用。

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