該項(xiàng)研究目的是研究apelin及其受體APJ在人成骨細(xì)胞的表達(dá)和apelin對(duì)成骨細(xì)胞的作用。

    方法采用RT-PCR和Western印跡法檢測(cè)apelin和APJ在人成骨細(xì)胞的表達(dá)。用apelin處理人成骨細(xì)胞，^3H摻入法（^3H-TdR）和細(xì)胞計(jì)數(shù)法測(cè)定細(xì)胞的增殖，通過(guò)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶（ALP）活性、骨鈣素分泌水平和Ⅰ型膠原的生成來(lái)分析細(xì)胞功能。Western印跡法檢測(cè)信號(hào)通路的激活。通過(guò)小分子干擾核糖核酸（siRNA）技術(shù)阻斷APJ，觀察其對(duì)細(xì)胞增殖和信號(hào)通路的影響。結(jié)果Apelin和APJ在人成骨細(xì)胞均有表達(dá)，Apelin能促進(jìn)人成骨細(xì)胞增殖，但對(duì)其ALP活性、骨鈣素的分泌和Ⅰ型膠原的生成無(wú)影響。通過(guò)siRNA技術(shù)阻斷APJ能消除apelin對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用。Apelin能誘導(dǎo)人成骨細(xì)胞磷脂酰肌醇3激酶（P13K）下游底物蛋白激酶B（Akt）的活化，但不能誘導(dǎo)c-junN一端激酶（JNK）、p38和細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1／2（ERK1／2）等絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）的活化。

    siRNA干擾APJ對(duì)Akt的活化起抑制作用。P13K抑制劑（LY294002）能消除apelin對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用和Akt的活化。

    由此得出結(jié)論人成骨細(xì)胞表達(dá)apelin和APJ，Apelin通過(guò)APJ／P13K／Akt途徑促進(jìn)人成骨細(xì)胞增殖，但對(duì)其分化無(wú)影響。