中國(guó)研究者探討了免疫磁珠分離羊水來(lái)源OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞的可行性。研究者采用免疫磁珠細(xì)胞分選法去除羊水細(xì)胞中CD44和SSEA4陽(yáng)性細(xì)胞,使OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞間接得到分離,體外培養(yǎng)擴(kuò)增后,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)特性,免疫熒光染色計(jì)算OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞得率,Real―TimePCR比較分離前后OCT-4表達(dá)量的差異,免疫組化檢測(cè)NANOG、AKP、MAP-2、NGFR和Myosin等細(xì)胞因子的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)免疫磁珠分離的細(xì)胞接種12h內(nèi)貼壁生長(zhǎng),形態(tài)呈梭形,部分呈多角形.
融合后形成輻射狀排列。免疫熒光染色OCT-4陽(yáng)性細(xì)胞得率為(90.15±8.25)%,Real―TimePCR檢測(cè)結(jié)果顯示分離后細(xì)胞OCT-4的表達(dá)量較未分離細(xì)胞和M義有顯著性差異(P〈0.01)。原代培養(yǎng)可獲得(1~2)×10^7個(gè)細(xì)胞,3代可獲得(2~4)×10^8個(gè)細(xì)胞.傳至10代以后細(xì)胞的增殖能力下降。免疫組化結(jié)果顯示OCT-4陽(yáng)性胎兒干細(xì)胞表達(dá)NANOG、AKP、MAP-2和NGFR等細(xì)胞因子。由此,研究者得出結(jié)論,免疫磁珠細(xì)胞分選法可以從羊水中分離出OCT-4陽(yáng)性的胎兒干細(xì)胞,分離后的細(xì)胞保持干細(xì)胞原有特性及生物學(xué)特征,可作為組織工程種子細(xì)胞。
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