5月7日消息，中國(guó)研究者運(yùn)用了RNA干擾技術(shù)阻斷人舌鱗狀細(xì)胞癌Tea8113細(xì)胞中Skp2基因的表達(dá)，觀察Skp2基因沉默后對(duì)Tea8113細(xì)胞的影響。

研究者采用真核轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒pRNAT-U6．1／Neo構(gòu)建針對(duì)Skp2基因的重組轉(zhuǎn)染質(zhì)粒。經(jīng)聚乙烯亞胺法將其轉(zhuǎn)染Tea8113細(xì)胞，通過(guò)反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcrip-tase polymerase chain reaction，RT-PCR）、Western blot檢測(cè)Skp2、p27表達(dá)的變化；流式細(xì)胞儀、甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl terrazolium，MTT）法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后Tea8113細(xì)胞的細(xì)胞周期、生長(zhǎng)速度的變化。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒Skp2shRNA-2、Skp2shRNA-3后，Tea8113細(xì)胞內(nèi)Skp2基因在mRNA和蛋白水平上均下調(diào)表達(dá)（P〈0．01），p27基因蛋白水平上調(diào)表達(dá)（P〈0．01）；而各重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后p27基因的mRNA水平無(wú)明顯變化。重組質(zhì)粒Skp2shRNA-2、Skp2shRNA-3轉(zhuǎn)染Tea8113細(xì)胞后，與對(duì)照組相比，G1～G0期細(xì)胞增加了約22％（P〈0．01），G2～M期和S期細(xì)胞減少了約10％和12％（P〈0．01），細(xì)胞的生長(zhǎng)速度明顯變慢（P〈0．01）。

由此，研究者得出結(jié)論，初步證明了Skp2、p27基因在口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞分化增殖中所扮演的重要角色；篩選出了高效RNA干擾重組質(zhì)粒Skp2shRNA-2、Skp2shRNA-3，為進(jìn)一步研究以Skp2基因?yàn)榘悬c(diǎn)的人舌鱗狀細(xì)胞癌基因治療奠定了基礎(chǔ)。