(上海)為了通過檢測體外培養的人肋軟骨細胞老化過程中Ⅰ、Ⅱ型膠原和蛋白聚糖(aggrecan)的表達變化，為組織工程軟骨構建的種子細胞選擇適宜的回植時機，研究者取體外培養的P1～P5人肋軟骨細胞，通過觀察細胞形態，細胞增殖率，Alcian blue法定量檢測每代Aggrecan中GAG含量，免疫組化蛋白水平觀察Ⅰ、Ⅱ型膠原表達及RT-PCR從mRNA水平分析Ⅰ、Ⅱ型膠原及Aggrecan基因表達量。結果人肋軟骨細胞從第3代起逐漸向成纖維樣細胞形態轉換；每代軟骨細胞Aggrecan中GAG含量隨傳代次數逐漸降低，第3代后處于較低水平；Ⅰ、Ⅱ型膠原的表達在蛋白水平及mRNA水平基本一致，第2代以前Ⅱ型膠原表達較強，Ⅰ型膠原表達較弱；之后隨傳代Ⅱ型膠原表達減弱，Ⅰ型膠原表達逐漸增強；而Aggrecan在第3代以前表達較高，從第4代后明顯下降。可見人軟骨細胞體外培養老化過程中綜合細胞擴增及細胞功能因素，第2代的軟骨細胞(體外擴增約18.326倍)可作為構建人組織工程軟骨的種子細胞。 /**/