（蘇州）為了探討WT1基因異構體對急性早幼粒細胞白血病細胞株NB4分化的影響及其分子機制，研究者用電穿孔法將攜帶WT1基因異構體WTA(-17AA/-KTS)全長cDNA的重組真核表達載體及其對照質粒pCB6+轉導NB4細胞，建立WT1基因異構體表達比例改變的單克隆細胞株。通過形態學觀察，細胞周期動力學檢測，NBT還原試驗，細胞表面分化抗原CD11b的檢測了解外源性WT1基因異構體WTA在全反式維甲酸(ATRA)誘導下對NB4細胞分化的影響。用RT-PCR檢測細胞中PML/RARαt、p21、c-myc基因表達的改變。結果 ATRA處理細胞48 h，對照組(轉染空載體的NB4/CMV和未轉導WTA的NB4細胞)細胞分化明顯，NB4/WTA細胞只出現部分分化。流式細胞術檢測NB4/WTA細胞CD11b相對熒光強度(4.63±1.63)低于對照組(8.15±1.84)，ATRA作用24 h后CD11b相對熒光強度(31.42±5.65)與對照組(71.95±9.36)相比差異更為明顯。NB4/WTA細胞NBT還原能力較對照組下降，經ATRA處理后兩組細胞之間的NBT還原能力的差異更加明顯。RT-PCR提示NB4/WTA細胞PML/RARα、p21、c-myc基因的表達較對照組升高。可見增加外源性WT1基因異構體WTA的表達從而將WT1基因異構體表達的比例由+17AA/+KTS優勢型轉變為-17AA/-KTS優勢型能部分抑制ATRA對NB4細胞的誘導分化作用，這可能與PML/RARαt、p21、c-myc基因表達上調有關。/**/