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反義Bmi-1對Jurkat細(xì)胞的抑制作用

【?2005-11-18 發(fā)布?】 臨床報(bào)道  

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     (大連)為了觀察反義Bmi-1表達(dá)質(zhì)粒在體外對T淋巴細(xì)胞白血病Jurkat細(xì)胞的生長抑制作用,研究者選擇Bmi-1基因起始密碼子及與鋅指結(jié)構(gòu)對應(yīng)的171 bp核苷酸片段,反向連接于pLNCX2質(zhì)粒上,得到反義Bmi-1表達(dá)質(zhì)粒;通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染將質(zhì)粒導(dǎo)入Jurkat細(xì)胞中,以G418進(jìn)行篩選得到陽性克隆;以MTT法和體外集落形成實(shí)驗(yàn)檢測反義Bmi-1表達(dá)質(zhì)粒對Jurkat細(xì)胞增殖的抑制作用,用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期,采用免疫熒光組化法檢測反義Bmi-1對Jurkat細(xì)胞P16蛋白的上調(diào)作用。結(jié)果轉(zhuǎn)染反義Bmi-1表達(dá)質(zhì)粒組與對照組(空白對照及空質(zhì)粒組)相比較,生長速度明顯變慢,克隆形成能力明顯下降,空白對照組Jurkat細(xì)胞集落數(shù)為(90.70±9.07)/103細(xì)胞,空質(zhì)粒組Jurkat細(xì)胞集落數(shù)為(83.30±6.11)/103細(xì)胞,轉(zhuǎn)染反義質(zhì)粒組Jurkat細(xì)胞集落數(shù)為(56.00±5.56)/103-細(xì)胞(P<0.01);P16蛋白表達(dá)也明顯增強(qiáng)。可見反義Bmi-1對Jurkat細(xì)胞的體外生長具有明顯的抑制作用,并上調(diào)了P16蛋白的表達(dá)。/**/
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