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體外擴增臍血間充質干細胞的生物學特性和誘導分化潛能

【?2005-11-24 發布?】 臨床報道  

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(山東)為了從臍血中分離單個核細胞(MNCs),體外培養擴增間充質干細胞(MSCs)并研究其生物學特性和誘導分化潛能,研究者取35份足月順產新生兒臍血,密度梯度離心法分離出其中的MNCs,采用含胎牛血清的DMEM培養基體外培養擴增MSCs。顯微鏡下觀察MSCs的形態、細胞化學染色,流式細胞儀測定MSCs的細胞免疫表型,體外誘導分化實驗檢測MSCs分化成骨細胞、脂肪細胞和神經細胞的能力。結果從12份臍血中可培養出MSCs,形態上與從其他來源的MSCs類似,可傳至20代而無形態上的變化。細胞化學染色示堿性磷酸酶(ALP)陰性,非特異性酯酶--α-丁酸萘酚酯酶(alpha-naphthol butyric acid esterase,NBE)陽性。其表達CD29、CD44和CD105,特別是人類MSCs標記SH-2 和 SH-3 陽性,而CD3、CD14、CD19、CD34和CD45陰性,說明它們并非來自造血細胞。這些MSCs在適當誘導分化劑的作用下,2周左右可以誘導分化形成骨細胞, 20天左右可以誘導分化形成脂肪細胞。臍血MSCs預誘導12 h后,胞體發生收縮,細胞邊緣有細的突起。正式誘導5 h后大多數細胞呈現典型的神經元樣??梢娞耗氀狹NCs可分離培養出MSCs。這些MSCs具有與其他來源MSCs類似的表型及分化潛能。 /**/
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