上海創(chuàng)建大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺(tái)

【?2005-08-11 發(fā)布?】　美迪醫(yī)訊

上海交通大學(xué)腫瘤研究所等單位的科研人員經(jīng)過(guò)多年攻關(guān)，創(chuàng)建了大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺(tái)，通過(guò)該平臺(tái)可直接篩出具有影響細(xì)胞生長(zhǎng)、腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)基因，具有重要的潛在的應(yīng)用與開(kāi)發(fā)價(jià)值。該研究日前獲得2004年上海市科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)。

該研究項(xiàng)目為上海市科委發(fā)展基金重點(diǎn)項(xiàng)目，由上海交通大學(xué)腫瘤研究所、上海市腫瘤研究所癌基因及相關(guān)基因國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和中科院上海生命科學(xué)院上海生物工程研究中心的顧健人院士、楊勝利院士、萬(wàn)大方研究員及龔毅研究員等共同完成。該研究創(chuàng)建了大規(guī)模細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)平臺(tái)，以人胎盤(pán)、胎兒及肝組織cDNA文庫(kù)為材料，以人肝癌細(xì)胞SMMC－7721及小鼠NIH／3T3成纖維細(xì)胞為對(duì)象，以促進(jìn)和抑制細(xì)胞克隆形成率及細(xì)胞灶形成率為指標(biāo)，在基因組水平克隆篩選出對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有促進(jìn)／抑制作用的基因，然后測(cè)序，進(jìn)行生物信息學(xué)分析，最后確定其屬性，同時(shí)建立了各種細(xì)胞芯片的技術(shù)平臺(tái)。

研究中，在人胎盤(pán)、胎兒及肝組織三種cDNA文庫(kù)鋪板共15萬(wàn)個(gè)cDNA克隆，應(yīng)用自行設(shè)計(jì)的"自身雜交"的負(fù)篩選技術(shù)，挑選出相對(duì)低豐度的克隆3萬(wàn)個(gè)，分別對(duì)肝癌細(xì)胞進(jìn)行了29910個(gè)cDNA轉(zhuǎn)染，對(duì)NIH／3T3細(xì)胞進(jìn)行了22926個(gè)cDNA轉(zhuǎn)染，共選出對(duì)細(xì)胞具有促進(jìn)或抑制生長(zhǎng)作用的基因3814個(gè)（8251個(gè)克隆），其中2836個(gè)（6958個(gè)克隆）屬已知基因，372個(gè)（384個(gè)克隆）為新基因，待確定的序列598個(gè)（895個(gè)克隆）。

據(jù)悉，對(duì)具有促進(jìn)或抑制細(xì)胞生長(zhǎng)功能的372個(gè)新基因和新技術(shù)平臺(tái)，已申請(qǐng)48項(xiàng)，至今已獲國(guó)家34項(xiàng)（256個(gè)基因）。獲得具有血清學(xué)診斷前景的候選基因兩個(gè)、藥靶候選基因兩個(gè)、促進(jìn)血管新生基因1個(gè)、基因治療用候選基因3個(gè)。

本文關(guān)鍵字: 細(xì)胞DNA

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