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東大成功觀測(cè)分子級(jí)別的真核細(xì)胞分裂

【?2002-12-24 發(fā)布?】 美迪醫(yī)訊
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    東京大學(xué)研究生院教授浜口宏夫和該研究生院一年級(jí)博士生黃郁珊等人利用浜口開發(fā)的“時(shí)空分解拉曼散射光譜技術(shù)”,在全世界首次成功地在分子級(jí)別觀測(cè)到了真核細(xì)胞的細(xì)胞分裂的連續(xù)變化過程。觀測(cè)對(duì)象為酵母菌。 

  過去通常都是先給對(duì)象細(xì)胞染色,然后利用電子顯微鏡作為靜態(tài)圖像進(jìn)行觀測(cè)的。此次所用的最新分析技術(shù)有可能對(duì)生命科學(xué)研究領(lǐng)域帶來巨大的影響。研究成果的詳細(xì)內(nèi)容將刊登在2003年2月出版的拉曼散射光譜學(xué)術(shù)雜志《Journal of Raman Spectroscopy(拉曼散射光譜雜志)》上。 

  此次實(shí)驗(yàn)是利用波長(zhǎng)為632.8nm的紅色光進(jìn)行的。利用拉曼散射光譜技術(shù)分析生物物質(zhì)時(shí),一般不使用高能量的短波長(zhǎng)電磁波。其原因是因?yàn)楦吣芰侩姶挪ú粌H會(huì)破壞生物物質(zhì),而且作為背景噪聲(Background Noise)的螢光發(fā)光增強(qiáng)之后,發(fā)自觀測(cè)對(duì)象的光譜就會(huì)被掩蓋掉。浜口等人以前曾經(jīng)利用波長(zhǎng)為1064nm的低能量近紅外光的空間分解拉曼散射光譜技術(shù),成功地在分子水平上區(qū)分出了癌細(xì)胞和正常細(xì)胞。當(dāng)時(shí)盡管面臨難以檢測(cè)到近紅外光的問題,但通過與日本浜松光電公司(Hamamatsu Photonics)等單位合作,已成功解決了這一問題。 

  在此次實(shí)驗(yàn)中所用的紅色光盡管其波長(zhǎng)范圍能夠利用市售的設(shè)備進(jìn)行檢測(cè),但卻有可能破壞生物物質(zhì)。因此黃郁珊將入射光的能量降低到了1mW,與普通的拉曼散射光譜技術(shù)中使用的能量相比降低一個(gè)數(shù)量級(jí)。為了確定入射光照射的位置,利用綠色螢光蛋白質(zhì)對(duì)酵母菌的細(xì)胞核進(jìn)行了染色。從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果來看,盡管當(dāng)初預(yù)計(jì)由于螢光噪音的影響將可能得不到酵母菌的光譜,但在細(xì)胞分裂的各個(gè)階段均得到了明顯的不同光譜,而且細(xì)胞也沒有受到破壞。 

  在細(xì)胞研究領(lǐng)域,由細(xì)胞開始分裂到完全分裂成2個(gè)細(xì)胞,直至這些細(xì)胞開始下一次分裂為止的時(shí)間被稱為“細(xì)胞周期”。比如,細(xì)胞核分裂的階段稱為“M期”,開始進(jìn)行DNA合成準(zhǔn)備的階段稱為“G1期”,合成DNA的階段稱為“S期”,細(xì)胞分裂成兩個(gè)、然后開始為下一次細(xì)胞核分裂做準(zhǔn)備的階段稱為“G2”。 

  浜口利用此次得到的酵母菌照片和光譜,推測(cè)了在細(xì)胞周期中出現(xiàn)的細(xì)胞構(gòu)成要素。也就是說,由于在M期的前期構(gòu)成細(xì)胞核的蛋白質(zhì)光譜較強(qiáng),而在后期則是具有粒線體的類脂體的光譜較強(qiáng),并由此推測(cè)最初在有細(xì)胞核的部分產(chǎn)生了粒線體(Mitochondria)。由S期到G2期,由于構(gòu)成細(xì)胞壁的多糖類物質(zhì)光譜較強(qiáng),由此推測(cè)到了細(xì)胞壁的成長(zhǎng)。今后,浜口等人將繼續(xù)利用拉曼光譜技術(shù)對(duì)其他細(xì)胞進(jìn)行分析,以便在分子級(jí)別研究生命現(xiàn)象。/**/
本文關(guān)鍵字: 真核細(xì)胞分裂 
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