（上海）為了對1個遺傳性抗凝血酶(AT)缺陷癥家系進行AT抗原(AT:Ag)、活性(AT:A)和基因突變檢測并對該突變導致的AT結構和功能的變化進行研究。研究者采用免疫比濁法和發色底物法分別檢測AT:Ag和AT:A，用PCR法對先證者AT基因的7個外顯子及其側翼內含子序列進行擴增，PCR產物純化后直接測序，檢測其基因突變。根據基因檢測結果，對家系成員相應外顯子進行PCR擴增，擴增產物直接測序。用大引物法構建突變的AT表達質粒并瞬時轉染COS-7細胞，用ELISA法檢測細胞培養上清液和細胞內提取物中AT:Ag。結果先證者的AT:Ag和AT:A分別為179 mg/L和42.3%，為Ⅰ型AT缺陷；AT基因測序顯示在AT外顯子6區存在G13328A雜合突變，導致Ala(GCC)404→Thr(ACC)。對家系成員進行的基因測序顯示有3人(Ⅱ2、Ⅱ3、Ⅲ2)存在該突變。突變質粒在細胞培養上清液和細胞內的AT:Ag分別為正常人的40%和68%。可見該家系為Ⅰ型遺傳性AT缺陷癥,G13328A雜合突變是導致先證者血栓形成的原因。 /**/