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mdr1和GSTπ基因緘默逆轉K562/A02細胞多藥耐藥性

【?2006-04-15 發布?】 臨床報道  

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    (上海)為了研究短發夾狀小分子干擾RNA(short hairpin RNA,shRNA)對白血病多藥耐藥細胞株K562/A02 mdr1和谷胱甘肽S-轉移酶(GST)π基因的表達和功能的影響。研究者根據mdr1mRNA第79~99位和GSTπ mRNA第308~327位核苷酸為作用靶點,合成針對靶區域序列的shRNA,克隆入pSilencer2.1-U6 neo,克隆產物為pSilence-mdrl和pSilence-GSTπ,轉染K562/A02細胞株。用實時熒光定量PCR檢測K562/A02細胞mdr1和GSTπ mRNA的表達;MTT法檢測阿霉素對K562/A02細胞半數抑制濃度(IC50)。結果經pSilence-mdr1轉染后的K562/A02細胞mdr1 mRNA表達量下降了71.5%,從(2.80±1.65)×108拷貝/μgRNA下降至(3.90±2.37)×107拷貝/μg RNA(P<0.01);同時pSilence-GSTπ作用后,K562/A02細胞GSTπ mRNA表達量較對照組下降了39.8%,從(2.30±1.14)×105拷貝/μg RNA下降至(5.40±2.45)×104拷貝/μg RNA(P<O.01);空載體轉染后阿霉素的耐藥指數為23,pSilence-mdr1轉染后為8,pSilence-GSTπ轉染后為10,差異有統計學意義(P<0.01)。可見shRNA可有效逆轉K562/A02細胞mdr1和GSTπ的多藥耐藥性。/**/
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