（上海）為了研究短發(fā)夾狀小分子干擾RNA(short hairpin RNA，shRNA)對白血病多藥耐藥細(xì)胞株K562/A02 mdr1和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)π基因的表達(dá)和功能的影響。研究者根據(jù)mdr1mRNA第79～99位和GSTπ mRNA第308～327位核苷酸為作用靶點(diǎn)，合成針對靶區(qū)域序列的shRNA，克隆入pSilencer2.1-U6 neo，克隆產(chǎn)物為pSilence-mdrl和pSilence-GSTπ，轉(zhuǎn)染K562/A02細(xì)胞株。用實(shí)時熒光定量PCR檢測K562/A02細(xì)胞mdr1和GSTπ mRNA的表達(dá)；MTT法檢測阿霉素對K562/A02細(xì)胞半數(shù)抑制濃度(IC50)。結(jié)果經(jīng)pSilence-mdr1轉(zhuǎn)染后的K562/A02細(xì)胞mdr1 mRNA表達(dá)量下降了71.5%，從(2.80±1.65)×108拷貝/μgRNA下降至(3.90±2.37)×107拷貝/μg RNA(P＜0.01)；同時pSilence-GSTπ作用后，K562/A02細(xì)胞GSTπ mRNA表達(dá)量較對照組下降了39.8%，從(2.30±1.14)×105拷貝/μg RNA下降至(5.40±2.45)×104拷貝/μg RNA(P＜O.01)；空載體轉(zhuǎn)染后阿霉素的耐藥指數(shù)為23，pSilence-mdr1轉(zhuǎn)染后為8，pSilence-GSTπ轉(zhuǎn)染后為10，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。可見shRNA可有效逆轉(zhuǎn)K562/A02細(xì)胞mdr1和GSTπ的多藥耐藥性。/**/