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人胰腺癌hedgehog信號轉導途徑中PTCH基因的克隆與鑒

【?2006-07-03 發布?】 臨床報道  

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    (上海)為了克隆人胰腺癌hedgehog信號通路中PTCH基因,構建PTCH基因表達載體并誘導融合蛋白表達。研究者從人胰腺癌細胞株SW1990抽提總RNA,經R-PCR擴增出PTCH基因,經純化、回收目的基因PTCH,將其插入表達載體PET22b,轉化E.coliBL21-CodonPlusTM-RP,構建重組質粒PET22b/PTCH,IPTG誘導表達融合蛋白,免疫印跡進行鑒定。結果從人胰腺癌細胞株SW1990克隆出長為789 bp PTCH目的片段,成功構建重組質粒PET22b/PTCH,并誘導表達目的蛋白。可見構建重組質粒PET22b/PTCH,并表達PTCH融合蛋白,為制備PTCH多克隆抗體打下良好基礎。/**/
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