(武漢)為了探討阿霉素與腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)真核表達(dá)載體誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞凋亡的協(xié)同作用。研究者采用 RT-PCR方法克隆人TRAIL全長(zhǎng)基因,并插入真核表達(dá)載體pLXIN多克隆位點(diǎn),經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定。將pLXIN-TRAIL質(zhì)粒轉(zhuǎn)染PC3-M細(xì)胞,RT-PCR方法檢測(cè)外源性TRAIL表達(dá)率,TUNEL染色和流式細(xì)胞術(shù)比較單獨(dú)表達(dá)TRAIL和聯(lián)合應(yīng)用阿霉素對(duì)PC3-M細(xì)胞凋亡率的影響,Western blot法檢測(cè)經(jīng)阿霉素誘導(dǎo)前后PC-3M細(xì)胞死亡受體-5(DR5)的表達(dá)變化。結(jié)果成功構(gòu)建pLXIN-TRAIL真核表達(dá)載體,外源性TRAIL表達(dá)可以誘導(dǎo)PC-3M細(xì)胞凋亡,阿霉素能夠增強(qiáng)TRAIL的凋亡誘導(dǎo)效應(yīng),6μg pLXIN-TRAIL質(zhì)粒DNA組,加入1 mg/L阿霉素前后平均凋亡率分別為11.8%和20.7%,同時(shí)可提高PC-3M細(xì)胞DR5的表達(dá)。可見TRAIL真核表達(dá)載體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡是治療前列腺癌的新途徑,阿霉素可以通過提高DR5表達(dá)而增強(qiáng)PC-3M細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的凋亡敏感性。/**/