近日，華中科技大學同濟醫院麻醉學教研室徐穎博士等，在一項國家自然科學基金資助的課題中，采用分子克隆技術，構建成功一株可用于基因治療慢性疼痛的“腦啡肽永生化大鼠星形膠質細胞株（IAST）”。

    近年來，轉基因細胞移植鎮痛為慢性疼痛的治療開辟了新領域。轉基因細胞移植鎮痛，是將外源性鎮痛物資基因導入靶細胞內，再將這種基因修飾細胞回輸入機體，使其分泌具有鎮痛作用的活性產物，來達到治療之目的的。然而，傳統的轉基因鎮痛模式不能調控鎮痛物質的分泌，而外源鎮痛基因在宿主體內持續表達則會帶來諸多不良后果。

    為探尋一種精確調控外源基因的表達模式，研究人員以人前腦啡肽原基因（hPPE)為基礎，采用分子克隆技術，將hPPE逆轉錄到病毒四環素反應質粒(pRevTRE/hPPE)載體上，通過病毒載體包裝、熒光素酶活性檢測、誘導表達及間接免疫熒光染色等系列技術處理后，成功地克隆出一株受四環素及其衍生物強力霉素定量調控表達腦啡肽的永生化大鼠星形膠質細胞株。

    經酶切鑒定及DNA序列檢測，結果發現：該細胞株重組質粒中含有hPPE基因，誘導表達值為876.1，背景表達值為42.5，誘導倍數為20.6倍，hPPE擴增片段為950bp，強力霉素劑量與hPPEmRNA表達呈顯著正相關（P<0.05）。提示新克隆的細胞株具有原病毒載體高表達特征。

    據研究人員介紹，hPPE是慢性疼痛基因治療中較理想的選擇基因，其編碼的前腦啡肽原，經酶切可加工出蛋氨酸腦啡肽和亮氨酸腦啡肽，它們是一種內源性阿片肽，廣泛分布于外周和中樞神經系統，是重要的鎮痛介質。本研究建立的調控表達人前腦啡肽原基因的星形膠質細胞株，經進一步完善后移植到人體內，即可根據疼痛狀態，人為地調控鎮痛基因表達的時間和水平。因此，該細胞系的成功建立，不僅為可調控轉基因細胞移植提供了理想的細胞載體，而且為人類治療慢性疼痛這一頑疾開辟了新途徑。