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穩定轉染ERβ基因對MCF-7乳腺癌細胞系生長特性的影響

【?2006-10-16 發布?】 臨床報道  

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    (北京)為了研究在不同處理因子作用下,外源基因ER β的表達對MCF-7乳腺癌細胞系生長特性的影響。研究者利用lipofectamine 2000將ER β真核表達載體pCDNA3-ER β導入MCF-7乳腺癌細胞系。采用含雌激素應答元件(ERE)的熒光素酶報告基因及Western blot方法,檢測轉染細胞中ER β的轉錄活性和蛋白表達水平,篩選陽性克隆。以親本細胞MCF-7及轉染空載體質粒pCDNA3的MCF-7細胞為對照,在雌激素E2和雌激素受體拮抗劑4-OHT作用下觀察細胞的生長特點。結果在轉染ER β基因的MCF-7細胞系中,ER β的轉錄激活活性明顯升高;Western blot檢測證實,ER β的蛋白表達水平顯著增高。在無處理因子情況下,外源基因ER β在MCF-7細胞系中的表達對細胞的形態及生長速度無明顯影響。與親本細胞MCF-7及轉染空載體質粒的MCF-7細胞相比,穩定轉染ER β的MCF-7細胞對雌激素的敏感性下降,但對4-OHT處理的敏感性無明顯減少。可見外源性ER β基因在MCF-7乳腺癌細胞中的穩定表達不增加對4-OHT的耐藥性,但使之對雌激素的敏感性下降。 /**/
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