VEGF shRNA表達質粒穩定轉染可高效抑制RB細胞中VEGF的表達，靶向VEGF的RNA干擾可作為拮抗VEGF并治療RB的有效手段。 視網膜母細胞瘤是嬰幼兒最常見的眼內惡性腫瘤，有遺傳型和不遺傳型，愈后極差。 中華眼科雜志6月第6期刊登一項研究，研究者構建VEGF shRNA表達質粒p4．1CMV―VEGF shRNA，以脂質體介導其轉染兩種RB細胞系SO―RB50和HXO―RB44，新霉素篩選結合梯度稀釋法獲得p4．1CMV―VEGF shRNA陽性RB細胞單克隆，繼續培養擴增建立p4．1CMV―VEGF shRNA陽性RB細胞，用熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）法檢測RB細胞中VEGF基因的表達，并用酶聯免疫吸附（ELISA）法檢測RB細胞上清中VEGF蛋白的表達；以與哺乳動物基因組無同源性的shRNA表達質粒p4．1CMV―Neg shRNA作為陰性對照，同時以未做任何處理組作為空白對照。探討血管內皮生長因子（VEGF）短發夾RNA（shRNA）表達質粒穩定轉染對視網膜母細胞瘤（RB）細胞中VEGF表達的作用。

    上海交通大學醫學院附屬第九人民醫院眼科賈仁兵等研究人員研究顯示成功構建p4．1CMV―VEGF shRNA并獲得其表達陽性的RB細胞克隆。陰性對照組和空白對照組SO-RB50細胞的VEGF基因表達量分別為實驗組的5．02倍和6．32倍；陰性對照組和空白對照組HXO―RB44細胞分別為實驗組的5．70倍和4．86倍。實驗組SO―RB50細胞上清中，VEGF蛋白濃度為（187．69±83．89）μg/L，顯著低于陰性對照組（822．98±187．98）μg/L和空白對照組（865．76±170．33）μg／L，差異有統計學意義（均P〈0．01）；實驗組HXO―RB44細胞上清中，VEGF蛋白濃度為（162．20±66．33）μg／L，與陰性對照組（764．33±164．79）μg／L和空白對照組（828．22±145．94）μg／L比較，差異也有統計學意義（均P〈0．01）。 因此可見VEGF shRNA表達質粒穩定轉染可高效抑制RB細胞中VEGF的表達，靶向VEGF的RNA干擾可作為拮抗VEGF并治療RB的有效手段。