萊伯先天性黑蒙(LCA)是常染色體隱性遺傳基因突變導致的視網膜營養不良中最嚴重的一類,通常在嬰兒出生起即有視力障礙。近日,美國和英國的學者分別報告,通過基因療法可以改善部分患者的癥狀(N Engl J Med 2008年4月27日在線發表)。 　　

    LCA:基因突變導致的視網膜營養不良 　　LCA是由于常染色體隱性遺傳導致的視網膜營養不良,可導致視網膜變性、視力受損。其中,包括RPE65在內的一系列基因突變可導致LCA患者從出生起視力受損,在30年內完全失明。LCA2即與RPE65基因突變有關。目前尚無治療LCA的有效方法。 　　

    RPE65名為視網膜色素上皮基因,編碼視網膜色素上皮中一個分子量為65 kDa的重要蛋白質,參與視黃醛等物質循環、視色素視紫紅質再生等關鍵步驟。人若缺乏該基因編碼的蛋白質,則11-順式視黃醛缺失,視桿細胞對光照刺激將不起反應。視錐細胞功能不依賴RPE65編碼的蛋白質,因此部分LCA患者在兒童時期會存有一些通過視錐細胞維持的視功能。但隨著時間的推移,視錐細胞變性,最終這部分視覺功能也會喪失。 　　

    治療LCA的基因療法 　　英國倫敦大學學院的Bainbridge等和美國賓夕法尼亞大學的Maguire等近日同時報告,用包含RPE65互補DNA(cDNA)的重組腺病毒伴隨病毒(AAV)載體對LCA患者進行視網膜下注射,能夠改善部分患者的視功能。 　　

    此前有動物研究顯示,以重組AAV作為載體,將包含人RPE65編碼序列和啟動子區域序列的cDNA片段導入,從視網膜下注射入天然模型動物瑞典布里犬(Swedish Briard dog,該種犬有天然RPE65突變),可以改善該動物的視功能(Genomics 1999, 57: 57)。 　　Bainbridge等的研究納入了3例因RPE65突變導致早發性嚴重視網膜營養不良的患者,年齡17~23歲,接受治療眼的視敏度均低于20/120。研究者給患者視網膜下注射攜帶RPE65 cDNA的AAV載體,觀察治療后第2、4、6個月時的效果。結果發現,沒有患者發生嚴重不良事件。所有患者的視敏度和外周視野均沒有顯著的臨床改善。通過視網膜電圖沒有檢測到視網膜反應。只有1例接受注射后12個月的患者,在微視野儀和暗適應視野儀下顯示出視功能顯著改善。在主觀視覺動感測試上,該患者也顯示出了改善。 　　Maguire等為3例年齡在19~26歲之間的LCA2患者注射了攜帶RPE65 cDNA的AAV載體,觀察注射后5個月的療效。 　　

    結果顯示,每例患者都在主觀視敏度檢測中顯示出了視網膜功能改善。瞳孔光反射測試顯示,治療后患者對光刺激的反應加強。有1例患者發生了無癥狀的黃斑裂孔,被認定屬于不良事件,但該患者視網膜功能仍得到部分恢復。 　　該療法有待更多研究驗證 　　美國哈佛醫學院的Miller醫師在述評中提到,目前已經發現7種基因突變與LCA有關,其中RPE65基因與6%的LCA有關。在動物實驗中,單次注射攜帶RPE65的AAV可以改善視功能,效果可持續8年。此次兩組研究者均采用了這樣的基因療法,但是視敏度檢查結果顯示,兩組患者改善并不一致。Miller認為,視敏度的檢測本身比較主觀,因此這樣的不一致并沒有實際意義。另外,Maguire等還檢查了患者的瞳孔對光反射,這是一個衡量視網膜功能的客觀指標,對于考察所用方法的療效更有意義。有1例患者出現了黃斑裂孔,雖然沒有臨床意義,但有待更深入的研究(N Engl J Med 2008年4月29日在線發表)。 　　兩組研究者和Miller均認為,該基因療法治療上述LCA患者在短期內比較安全,也有一定效果,但需要更大規模的臨床試驗、更長時間的隨訪。注射更大劑量的AVV是否會導致更加嚴重的并發癥、視網膜未完全變性的年輕患者接受該療法能否獲得更好的效果、是否能發現效果更理想的基因載體或基因片段等,都是有待解答的問題。