萊伯先天性黑蒙(LCA)是常染色體隱性遺傳基因突變導(dǎo)致的視網(wǎng)膜營養(yǎng)不良中最嚴(yán)重的一類,通常在嬰兒出生起即有視力障礙。近日,美國和英國的學(xué)者分別報(bào)告,通過基因療法可以改善部分患者的癥狀(N Engl J Med 2008年4月27日在線發(fā)表)。

      LCA:基因突變導(dǎo)致的視網(wǎng)膜營養(yǎng)不良

      LCA是由于常染色體隱性遺傳導(dǎo)致的視網(wǎng)膜營養(yǎng)不良,可導(dǎo)致視網(wǎng)膜變性、視力受損。其中,包括RPE65在內(nèi)的一系列基因突變可導(dǎo)致LCA患者從出生起視力受損,在30年內(nèi)完全失明。LCA2即與RPE65基因突變有關(guān)。目前尚無治療LCA的有效方法。

      RPE65名為視網(wǎng)膜色素上皮基因,編碼視網(wǎng)膜色素上皮中一個(gè)分子量為65 kDa的重要蛋白質(zhì),參與視黃醛等物質(zhì)循環(huán)、視色素視紫紅質(zhì)再生等關(guān)鍵步驟。人若缺乏該基因編碼的蛋白質(zhì),則11-順式視黃醛缺失,視桿細(xì)胞對(duì)光照刺激將不起反應(yīng)。視錐細(xì)胞功能不依賴RPE65編碼的蛋白質(zhì),因此部分LCA患者在兒童時(shí)期會(huì)存有一些通過視錐細(xì)胞維持的視功能。但隨著時(shí)間的推移,視錐細(xì)胞變性,最終這部分視覺功能也會(huì)喪失。

      治療LCA的基因療法

      英國倫敦大學(xué)學(xué)院的Bainbridge等和美國賓夕法尼亞大學(xué)的Maguire等近日同時(shí)報(bào)告,用包含RPE65互補(bǔ)DNA(cDNA)的重組腺病毒伴隨病毒(AAV)載體對(duì)LCA患者進(jìn)行視網(wǎng)膜下注射,能夠改善部分患者的視功能。

      此前有動(dòng)物研究顯示,以重組AAV作為載體,將包含人RPE65編碼序列和啟動(dòng)子區(qū)域序列的cDNA片段導(dǎo)入,從視網(wǎng)膜下注射入天然模型動(dòng)物瑞典布里犬(Swedish Briard dog,該種犬有天然RPE65突變),可以改善該動(dòng)物的視功能(Genomics 1999, 57: 57)。

      Bainbridge等的研究納入了3例因RPE65突變導(dǎo)致早發(fā)性嚴(yán)重視網(wǎng)膜營養(yǎng)不良的患者,年齡17~23歲,接受治療眼的視敏度均低于20/120。研究者給患者視網(wǎng)膜下注射攜帶RPE65 cDNA的AAV載體,觀察治療后第2、4、6個(gè)月時(shí)的效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn),沒有患者發(fā)生嚴(yán)重不良事件。所有患者的視敏度和外周視野均沒有顯著的臨床改善。通過視網(wǎng)膜電圖沒有檢測(cè)到視網(wǎng)膜反應(yīng)。只有1例接受注射后12個(gè)月的患者,在微視野儀和暗適應(yīng)視野儀下顯示出視功能顯著改善。在主觀視覺動(dòng)感測(cè)試上,該患者也顯示出了改善。

      Maguire等為3例年齡在19~26歲之間的LCA2患者注射了攜帶RPE65 cDNA的AAV載體,觀察注射后5個(gè)月的療效。

      結(jié)果顯示,每例患者都在主觀視敏度檢測(cè)中顯示出了視網(wǎng)膜功能改善。瞳孔光反射測(cè)試顯示,治療后患者對(duì)光刺激的反應(yīng)加強(qiáng)。有1例患者發(fā)生了無癥狀的黃斑裂孔,被認(rèn)定屬于不良事件,但該患者視網(wǎng)膜功能仍得到部分恢復(fù)。

      該療法有待更多研究驗(yàn)證

      美國哈佛醫(yī)學(xué)院的Miller醫(yī)師在述評(píng)中提到,目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)7種基因突變與LCA有關(guān),其中RPE65基因與6%的LCA有關(guān)。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,單次注射攜帶RPE65的AAV可以改善視功能,效果可持續(xù)8年。此次兩組研究者均采用了這樣的基因療法,但是視敏度檢查結(jié)果顯示,兩組患者改善并不一致。Miller認(rèn)為,視敏度的檢測(cè)本身比較主觀,因此這樣的不一致并沒有實(shí)際意義。另外,Maguire等還檢查了患者的瞳孔對(duì)光反射,這是一個(gè)衡量視網(wǎng)膜功能的客觀指標(biāo),對(duì)于考察所用方法的療效更有意義。有1例患者出現(xiàn)了黃斑裂孔,雖然沒有臨床意義,但有待更深入的研究(N Engl J Med 2008年4月29日在線發(fā)表)。

      兩組研究者和Miller均認(rèn)為,該基因療法治療上述LCA患者在短期內(nèi)比較安全,也有一定效果,但需要更大規(guī)模的臨床試驗(yàn)、更長時(shí)間的隨訪。注射更大劑量的AVV是否會(huì)導(dǎo)致更加嚴(yán)重的并發(fā)癥、視網(wǎng)膜未完全變性的年輕患者接受該療法能否獲得更好的效果、是否能發(fā)現(xiàn)效果更理想的基因載體或基因片段等,都是有待解答的問題。