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咔唑生物堿HY-1誘導(dǎo)K562細胞凋亡作用的研究

【?2006-02-25 發(fā)布?】 臨床報道  

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    (天津)為了研究咔唑生物堿HY-1對人慢性骨髓性紅白血病K562細胞的增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)作用,并探討其作用機制。研究者通過SRB法檢測HY-1對K562細胞體外增殖的影響;通過PI熒光染色法、羅丹明123染色法、AnnexinⅤ-PI染色法等流式細胞術(shù)和瓊脂糖凝膠電泳法,觀察HY-1處理K562細胞后凋亡相關(guān)指標的變化, 通過Western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白的變化。結(jié)果 HY-1對K562細胞體外增殖的半數(shù)抑制濃度(IC50)為 (29.05±0.90) μmol/L.隨著HY-1藥物濃度的增加和作用時間的延長,SubG1期細胞明顯增加,線粒體膜電位迅速下降,發(fā)生凋亡的細胞比例也顯著增加,而且經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測到了典型的DNA Ladder。Western blot結(jié)果顯示,細胞色素c (Cyt c)表達明顯增加;caspase-9酶原被剪切,且活化程度呈時間依賴性,caspase-3酶原及其作用底物PARP也發(fā)生了剪切, caspase-8表達無明顯變化。可見 HY-1能夠以劑量-時間依賴方式,通過線粒體激活途徑,誘導(dǎo)K562細胞發(fā)生凋亡,并由此發(fā)揮其抗腫瘤活性。/**/
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