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HIV-1 p24和gp41融合基因表達載體的構(gòu)建及融合蛋白

【?2006-04-14 發(fā)布?】 臨床報道  

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    (上海)為了用基因重組技術(shù)將HIV-1 p24基因以及gp41基因具有抗原線性中和表位的部分重組連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒,并在大腸埃希菌中高效表達融合蛋白,研究者設(shè)計帶有酶切位點的引物,分別PCR擴增p24和gp41兩個基因,將它們分別連接到pMD18-T載體中,測序驗證后,挑選出含有目的基因的正確克隆。將p24片段酶切后連接到gp41基因所在的pMD18-T載體中,再將連接后的兩個基因酶切,重新連接到pET21a表達載體中。將表達載體轉(zhuǎn)染大腸埃希菌誘導(dǎo)表達,經(jīng)Western-blot驗證表達正確。結(jié)果融合蛋白p24-gp41在大腸埃希菌中高效表達。可見融合蛋白p24-gp41可以在pET21a表達載體中高效表達。/**/
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