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siRNA對宮頸癌細胞系 HPV16 E6基因的作用

【?2006-05-14 發布?】 臨床報道  

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    (北京)為了構建并篩選出最有效的HPV16 E6基因特異的小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)表達載體,觀察其對宮頸癌細胞中HPV16 E6基因表達的長期影響,探討E6基因在宮頸癌發生過程中的分子作用機制,為臨床HPV感染及宮頸癌治療探索新方法。研究者構建Hairpin siRNA質粒,穩定轉染宮頸癌SiHa細胞,鑒定轉染細胞中的質粒DNA,通過Real-Time RT-PCR檢測細胞中HPV16 E6mRNA表達,采用Western-blot檢測p53、p21等蛋白的變化。MTT法(四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法)檢測SiHa細胞轉染siRNA后細胞增殖曲線。結果HPV16 E6A hairpin siRNA表達載體轉染人宮頸癌SiHa細胞,可以在細胞內長期表達siRNA,有效抑制細胞內HPV16 E6基因的表達。E6A siRNA能抑制細胞生長,作用持續達4個月以上。可見利用siRNA表達載體抑制整合在細胞中的外源HPV E6病毒癌基因可能是治療HPV感染和宮頸癌的一種新的理想方法。 /**/
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