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人角膜上皮干細(xì)胞的識別

【?2006-05-14 發(fā)布?】 臨床報(bào)道  

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    (天津)為了探討人角膜上皮干細(xì)胞的分子標(biāo)記。研究者對人角膜和角膜緣部位行組織學(xué)檢查以分析角膜緣解剖結(jié)構(gòu)。對人角膜切片和整個角膜組織行免疫組織化學(xué)染色以檢測中央角膜和角膜緣部位未分化標(biāo)記,如核蛋白p63、乳腺癌抵抗蛋白(ABCG2,BCRP1)、烯醇化酶α、整合素α6、α9 及β1、表皮生長因子受體(EGFR)、細(xì)胞角蛋白19(CK19)、14(CK14)及轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(CD71)的表達(dá), 經(jīng)熒光顯微鏡和激光掃描共焦顯微鏡觀察。對角膜中部和角膜緣上皮細(xì)胞的mRNA進(jìn)行半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和原位雜交以檢測其相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果角膜緣部位橫向切片顯示角膜緣上皮細(xì)胞為乳頭放射狀排列,對應(yīng)于Vogt柵欄環(huán)境。未分化標(biāo)記整合素β1、EGFR、烯醇化酶α及CK19在角膜緣基底細(xì)胞胞質(zhì)染色較表層細(xì)胞更強(qiáng); p63、ABCG2、整合素α9蛋白僅見于角膜緣基底部上皮細(xì)胞。激光掃描共焦顯微鏡觀察和RT-PCR結(jié)果顯示角膜緣表達(dá)p63、ABCG2、整合素α9蛋白及mRNA.原位雜交顯示p63僅表達(dá)于角膜緣基底層細(xì)胞。可見角膜緣上皮呈乳頭放射狀排列,角膜緣干細(xì)胞群具有復(fù)合標(biāo)記: p63表達(dá)于細(xì)胞核、ABCG2表達(dá)于胞質(zhì)、整合素α9表達(dá)于胞膜。采用這些標(biāo)記復(fù)合體,可將角膜緣干細(xì)胞群與其他上皮細(xì)胞區(qū)分。/**/
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