（成都）為了探討堿基錯(cuò)配對(duì)短發(fā)夾RNA(shRNA)逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞耐藥作用的影響。研究者針對(duì)mdr1基因mRNA合成一條序列正確的shRNA及正義鏈少1個(gè)堿基的對(duì)應(yīng)錯(cuò)配shRNA，構(gòu)建一對(duì)抗mdr1 shRNA真核表達(dá)載體，脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染白血病耐藥細(xì)胞株K562/A02。采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)mdr1 mRNA表達(dá)；柔紅霉素泵出實(shí)驗(yàn)檢測(cè)P-gp外排泵功能；MTT法檢測(cè)細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性。結(jié)果 序列正確和對(duì)應(yīng)錯(cuò)配shRNA真核表達(dá)載體均明顯下調(diào)mdr1 mRNA的表達(dá)，降低細(xì)胞膜P-gp外泵功能，60 min柔紅霉素泵出率分別為6%和10%，顯著低于對(duì)照組的45%；細(xì)胞內(nèi)柔紅霉素平均熒光強(qiáng)度分別為9.51和7.09，明顯高于對(duì)照組的2.80；對(duì)阿霉素藥物敏感性的相對(duì)逆轉(zhuǎn)率為90%和87%。可見(jiàn) 正義鏈堿基錯(cuò)配shRNA對(duì)RNA干擾功能無(wú)明顯影響，與序列正確的shRNA一樣可有效逆轉(zhuǎn)mdr1所致的耐藥。 /**/