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膀胱癌患者外周血樹突狀細(xì)胞的體外培養(yǎng)擴(kuò)增和鑒定

【?2007-05-27 發(fā)布?】 臨床報道  

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    (武漢)為了研究膀胱癌患者外周血樹突狀細(xì)胞(DC)的體外培養(yǎng)擴(kuò)增和鑒定。研究者應(yīng)用Ficoll-Hypaque離心獲得界面細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)2 h,獲得單個核細(xì)胞,體外以重組人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rhGM-CSF,50 ng/ml)+重組人白細(xì)胞介素4(rhIL-4,10 ng/ml)+人腫瘤壞死因子-α(hTNF-α,50 ng/ml)誘導(dǎo)培養(yǎng).倒置相差顯微鏡及掃描電鏡下觀察DC生長情況,流式細(xì)胞儀檢測DC表型,MTT法檢測DC活化的T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞BIU87的殺傷率。結(jié)果第6天體外培養(yǎng)的DC由貼壁狀態(tài)變?yōu)閼腋∶虪罴?xì)胞,第8天為形態(tài)不規(guī)則的毛刺狀,為典型DC形態(tài)。流式細(xì)胞儀檢測表明,成熟DC高水平表達(dá)CD1a、CD83、CD86及HLA-DR等。被DC激活的T細(xì)胞對膀胱癌細(xì)胞株BIU87的殺傷率為(48.8±3.7)%,未經(jīng)DC激活的T細(xì)胞的殺傷率為(25.7±1.5)%,2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。可見膀胱癌患者外周血經(jīng)rhGM-CSF+rhIL-4+hTNF-α體外誘導(dǎo)培養(yǎng)能誘導(dǎo)出DC。/**/
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