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DNA載體介導(dǎo)RNA干擾抑制LMP-1基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞轉(zhuǎn)移能 【?2007-07-03 發(fā)布?】 臨床報(bào)道
(廣州)為了探討應(yīng)用DNA載體介導(dǎo)RNA干擾技術(shù),抑制鼻咽癌細(xì)胞中EB病毒潛伏膜蛋白1(LMP-1)表達(dá)的可能性,觀察LMP-1基因沉默對(duì)鼻咽癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響。研究者 將能轉(zhuǎn)錄出干擾RNA的DNA模板插入pAVU6+27質(zhì)粒,構(gòu)建能夠介導(dǎo)RNA干擾的發(fā)夾狀干擾RNA(shRNA)表達(dá)載體。采用磷酸鈣共沉淀法,將質(zhì)粒導(dǎo)入EB病毒(+)的鼻咽癌細(xì)胞C611,篩選LMP-1基因沉默的克隆,通過觀察其貼壁生長能力、基底膜穿透能力和移動(dòng)能力的變化,分析LMP-1基因沉默對(duì)鼻咽癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響。結(jié)果 在shRNA表達(dá)載體有效轉(zhuǎn)染的C611細(xì)胞中,LMP-1基因的表達(dá)受到穩(wěn)定抑制。腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)表明,LMP-1基因沉默的C611細(xì)胞,貼壁生長能力提高,基底膜穿透能力和細(xì)胞移動(dòng)能力均明顯下降。可見 shRNA表達(dá)載體能夠在鼻咽癌細(xì)胞內(nèi)介導(dǎo)RNA干擾,并獲得對(duì)LMP-1基因穩(wěn)定的抑制。LMP-1基因可能通過貼壁生長能力、基底膜穿透能力和細(xì)胞移動(dòng)能力等,影響鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。/**/
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