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大鼠角膜堿燒傷的治療研究

【?2007-07-18 發布?】 臨床報道  

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    羊膜為載體的體外培養的人角膜緣上皮細胞移植可有效重建眼表,具有較高的臨床應用價值與發展前景。 堿性眼化學燒傷是臨床常見而處理棘手的眼外傷之一。傷后發生的無菌性角膜性角膜潰病、穿孔、眼球粘連及繼發性青光眼等,更是眼部致殘的常見原因。 中華眼科雜志二月第二期刊登一項研究,體外培養人角膜緣上皮細胞,通過免疫熒光染色法和逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法分析表型,BrdU摻人法檢測慢周期(slow-cycling)細胞。建立大鼠角膜堿燒傷模型,隨機分為單純對照組、羊膜移植(AMT)組及羊膜為載體的角膜緣上皮細胞移植(LSAT)組,術后通過裂隙燈顯微鏡觀察、角膜切片HE染色及免疫熒光染色等方法對各組大鼠眼表恢復情況進行評價。研究人角膜緣上皮細胞的生物學特性,探討體外培養的人角膜緣上皮細胞移植進行眼表重建的臨床應用價值及前景。 吉林大學第一醫院眼科楊威等研究人員研究顯示,培養早期大多數角膜緣上皮細胞p63和K19染色陽性,僅少數細胞K3染色陽性;隨培養時間的延長,K3陽性細胞增多,部分細胞同時表達p63和K3。RT-PCR示培養的角膜緣上皮細胞中p63和K12均有陽性表達,而角膜上皮細胞僅表達K12.BrdU摻入法檢測到慢周期細胞。動物實驗表明,LSAT可以顯著減輕角膜病變,使角膜恢復完整性和透明性,眼表評分各項指標與AMT組和對照組比較差異均有統計學意義。LSAT組大鼠角膜切片染色示大部分上皮細胞抗人核和K3染色陽性。 因此可見 體外培養的人角膜緣上皮細胞中p63不僅表達于角膜緣干細胞,在短暫擴充細胞中也有一定量的表達;慢周期細胞的存在證實了培養的角膜緣上皮細胞中角膜緣干細胞的存在,p63和K19陽性、K3陰性的細胞為角膜緣干細胞;羊膜為載體的體外培養的人角膜緣上皮細胞移植可有效重建眼表,具有較高的臨床應用價值與發展前景。/**/
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