本屆ADA年會特邀多位免疫治療學專家就幾種能夠有效維持1型糖尿病患者β細胞功能的免疫療法進行了廣泛交流。現就相關內容作一簡要介紹。  輸注自體臍帶血:改變1型糖尿病進程  在觀察到輸注自體臍帶血可延長1型糖尿病患兒“蜜月期”的基礎上,美國佛羅里達醫學院小兒內分泌學研究者對7例2至7歲新近診斷為1型糖尿病的患兒進行了自體臍帶血輸注治療,并隨機選取13例年齡和病程相匹配、僅接受胰島素強化治療的1型糖尿病患兒作為對照。治療6個月后的結果表明,與胰島素治療組相比,臍帶血輸注組的平均糖化血紅蛋白(HbA1c)水平(P=0.0031)和每日胰島素需求總量(P<0.0001)均較低,且平均血清C肽水平有所升高。治療中沒有觀察到輸血帶來的不良反應。  該研究的主要負責人Schatz博士就這一現象的可能機制進行了分析。他指出,調節性T細胞(Treg)在免疫調節中發揮了關鍵作用,它們可以抑制效應性T細胞(Teff)對自身和非自身抗原的反應活性,是維持外周免疫耐受的必需因子。而臍帶血富含Treg,輸注臍帶血治療6個月后檢測到患兒血液中Treg細胞數量增多。血糖水平的改善似乎和輸注這些臍帶血細胞有關。

    然而,此項研究還沒有明確這種益處可以持續多長時間,研究者會對這些患兒進行長期隨訪。  該研究的報告者Haller博士認為,恢復免疫耐受性是自身免疫研究的核心,并有可能延緩甚至中止糖尿病的進展。輸注臍帶血就像是提供了一種藥物,其中的免疫細胞(Treg)可能保護胰腺免受免疫系統的攻擊。通過使用Treg加上小量免疫抑制劑或其他免疫調節藥物或附加細胞治療來改變1型糖尿病的進程,稱作“雞尾酒”療法,該療法在某種意義上與HIV和癌癥的突破性治療類似。下一步的研究目標是明確該治療帶來益處的原因,這將有助于我們將來能夠分離和培養某些細胞來對大規模人群進行治療,而不僅僅是對那些儲存了臍帶血的患者,畢竟每個人都保存臍帶血是很難實施的。  此外,美國明尼蘇達兒童血液和骨髓移植中心Blazer博士認為,與成人血細胞相比,臍帶血Treg是更好的來源,因為這些T細胞具有更強的免疫耐受能力。臍帶血CD4+CD25+Treg易于純化,因此應用1型糖尿病患者臍帶血Treg來維持β細胞的功能具有較大潛力。  IL-2Rα單克隆抗體治療:延緩1型糖尿病進展  美國印第安納波利斯Rodriguez博士報告了在常規治療基礎上加用免疫抑制藥物daclizumab來阻止1型糖尿病發展的研究結果。daclizumab是一種人源化抗白介素-2受體α(IL-2Rα)的單克隆抗體。該研究納入34例3個月內確診為1型糖尿病的患者。結果顯示,與常規治療相比,加用免疫抑制藥物daclizumab可明顯增加患者血清C肽水平,減少外源胰島素的需要量,降低HbA1c水平并維持一段時間。Rodriguez博士認為,加用daclizumab是安全有效的,該藥有望作為1型糖尿病患者長期治療或誘導治療的有效方法之一。 

    重組人GAD65抗原治療:維持1型糖尿病患者的β細胞功能  瑞典學者Casa等的先期研究已表明,谷氨酸脫羧酶65(GAD65)免疫干預能夠阻止非肥胖糖尿病(NOD)小鼠發生糖尿病。在此基礎上,Casa再次報道了臨床應用重組人GAD65(Diamyd)治療可有效維持成人隱匿性自身免疫性糖尿病(LADA)和兒童1型糖尿病患者的β細胞功能。該項隨機、雙盲、安慰劑對照的多中心研究共篩選出70例10~18歲新診斷為1型糖尿病的患兒(女42例,男28例),這些患兒空腹C肽水平高于0.1 nmol/L,GAD65自身抗體為陽性。研究者將其隨機分入Diamyd組(20 μg注射1次,4周后再強化注射1次)或安慰劑組,并以12名年齡、性別相匹配的健康兒童作為對照組,治療前后應用標準混合餐試驗測定血清C肽水平來評估β細胞的功能,同時收集外周血單核細胞,使用流式細胞儀檢測表達Neuropilin/CTLA-4的Treg數量。  結果顯示,治療前安慰劑組和Diamyd組表達Neuropilin/CTLA-4的Treg百分比相近,且均顯著高于對照組(P=0.01)。在第一次注射治療3個月后,安慰劑組表達Neuropilin/CTLA-4的Treg細胞百分比高于Diamyd組(P=0.01),Diamyd組Treg百分比下降到與對照組相近的水平。相似的差異還表現在CD25+和CD4+淋巴細胞的細胞密度中位數上(P=0.01)。

    該結果提示,GAD治療能使1型糖尿病患兒循環中的Teff恢復并維持在健康對照水平,通過抑制Teff、誘導免疫耐受來維持胰腺β細胞功能。  轉導GAD65至造血干細胞:誘導自身抗原特異性免疫耐受  通過轉基因小鼠過表達胰島素自身抗原,可以預防NOD小鼠發生1型糖尿病。美國波士頓Jaeckel博士通過研究嘗試將自身抗原基因用逆轉錄病毒轉移至造血干細胞(HSC)來實現這一誘導耐受。由于在NOD小鼠中抗GAD的T細胞更易檢測,故研究者應用GAD65作為自身抗原,構建表達GAD的逆轉錄病毒,使其通過抗原呈遞細胞得到最佳表達;并用增強型綠色熒光蛋白(eGFP)進行修飾,以僅表達eGFP的逆轉錄病毒作為對照。  結果顯示,轉導GAD后,小鼠骨髓表現出長期的、多譜系的造血嵌合現象(hematopoetic chimerism)。僅接受eGFP轉導造血干細胞的小鼠表現出較強的抗GAD及其抗原決定簇的T細胞反應,而接受GAD轉導造血干細胞的小鼠表現為完全耐受。在GAD轉導的造血干細胞中,僅5%的嵌合現象就足以誘導GAD特異性耐受。然而,對GAD完全耐受的小鼠仍可發生1型糖尿病,其動力學和發病率與僅接受eGFP轉導造血干細胞的小鼠相同,再次證明GAD65不是NOD小鼠的重要自身抗原。  該結果首次證實了用逆轉錄病毒將自身抗原轉導至造血干細胞可導致T細胞完全耐受。表明利用其他自身抗原,使用同樣方法,在1型糖尿病的治療上具有巨大潛力。同時,這一模型無需建立轉基因動物即可檢測潛在抗原的重要性。 

    來自美國芝加哥西北大學的Miller博士報告了應用抗原特異方法治療自身免疫性疾病的進展,他們發現通過注射混有乙烯碳化二亞胺的多肽脾抗原呈遞細胞可在CD4+T細胞中誘導特異性無應答反應,從而阻止和治療多種自身免疫疾病。Miller博士及同事已完成了大部分對大鼠多發性硬化病的研究,目前正以接受同種異基因胰島移植的糖尿病大鼠為對象研究抗原特異治療的效果。