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哮喘:血小板源生長因子B及其受體與支氣管哮喘血管再生與重塑

【?2007-09-12 發布?】 臨床報道  

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    中國醫科大學第一臨床學院呼吸疾病研究所(110001) 

     血小板源生長因子PDGF-B 和它的受體, PDGFR-β,通過募集PDGFR-β陽性的間葉細胞祖細胞在穩定新生血管過程中起著重要的作用。缺乏PDGF-B 會導致壁細胞募集不充分,從而影響內皮細胞生長,滲透性,脆性改變,血管擴張,出血,灌注損傷以及缺氧。 為了明確血小板源生長因子PDGF-B和它的受體,PDGFR-β,在支氣管哮喘小鼠模型氣管及肺組織中的表達情況,我們進行了本試驗以進一步明確支氣管哮喘時血管相關因子的變化及其作用。雄性A /J 小鼠 30 只,分成三組,應用卵清蛋白制備小鼠模型。A 組:正常對照組;B 組:急性早期支氣管哮喘組;C 組:慢性延長期支氣管哮喘組。在戊巴比妥鈉麻醉狀態下,開腹,打開胸腔,分離氣管及肺組織,放入除RNA 酶自由水處理過的管中直接液氮冷凍,-80℃冷存。應用逆轉錄多聚酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測氣管和肺組織血小板源生長因子B 及其受體(PDGFB/PDGFRβ)mRNA 表達情況,應用Westernblot 方法檢測PDGFB/PDGFRβ蛋白表達水平。

    結果顯示:(1)應用RT-PCR 技術及瓊脂糖凝膠電泳, PDGF-B mRNA 在正常氣管未檢測到,而在慢性延長期哮喘小鼠氣管組織PDGF-B mRNA 顯示出清晰的條帶。周圍肺組織在正常小鼠也表達PDGF-B mRNA,哮喘小鼠肺組織表達增強,在慢性延長期表達明顯增加。PDGFRβ mRNA 的表達與PDGFB 相似,在正常氣管未檢測到,而在支氣管哮喘小鼠肺組織檢測到其表達,氣管組織在慢性延長期顯示出明顯的條帶。周圍肺組織在正常小鼠表達PDGFRβ,哮喘小鼠肺組織與正常組織比較,在急性早期變化不明顯,而在慢性延長期表達明顯增加。(2)應用Western blot 蛋白檢測技術,在慢性延長期哮喘小鼠氣管組織PDGF-B 顯示出清晰蛋白表達的條帶。與基因檢測結果相一致。周圍肺組織在正常小鼠也表達PDGF-B 蛋白,檢測結果顯示清晰的條帶,在慢性延長期表達明顯增加。在慢性延長期哮喘小鼠氣管組織PDGFRβ顯示出清晰蛋白表達的條帶。周圍肺組織在正常小鼠也表達PDGFRβ蛋白,哮喘小鼠肺組織與正常組織比較,在慢性延長期表達明顯增加。與基因檢測結果相一致。 <br> 結果表明:PDGFB和PDGFRβ基因與蛋白表達水平在支氣管哮喘氣管及肺組織均增加,特別在慢性延長期,PDGFB和PDGFRβ系統在支氣管哮喘氣道血管再生和重塑過程中起著重要的作用。

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