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應用嬰幼兒骨髓間充質干細胞體外構建組織工程化心肌

【?2008-09-30 發布?】 臨床報道  

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    該項研究目的是探討以先天性心臟?。╟ongenital heart disease,CHD)嬰幼兒骨髓間充質干細胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)作為種子細胞于體外構建組織工程化心肌組織的可行性。方法采用分離培養CHD嬰幼兒胸骨BMSCs,經5-氮雜胞苷誘導分化為心肌細胞,種植到可降解的載體――聚乳酸/羥基乙酸的共聚物(polyactic acid/glycolic acid homoconjugate,PLGA)上,加入含有10%胎牛血清的LG-DMEM培養液,搖床培養1周后種植到裸鼠背部皮下,分別在種植后1、2、3周處死裸鼠。實驗終止后通過光學顯微鏡、常規HE染色、蛋白質印記(Western Blotting)和透射電鏡觀察等對構建的組織工程化心肌組織進行評價。結果骨髓間充質干細胞經定向誘導分化后與PLGA構建的細胞-支架復合體培養1周后可見大部分細胞存活,有大量的細胞外基質分泌,植入裸鼠體內后3周取出標本大體觀察可見組織樣結構形成,Western blot檢測結果表明構建的心肌組織有心房利鈉肽(ANP)和心肌特異性肌球蛋白重鏈(MHC)的表達,透射電鏡下可見體外構建的工程化心肌具有肌絲,縫隙連接和閏盤樣結構形成。得出結論以CHD要幼兒BMSCs為種子細胞,PLGA為支架構建組織工程化心肌可行,構建的組織工程化心肌具有自體心肌的特性。/**/
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