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活細胞內(nèi)首次觀察到RNA運動 【?2009-12-01 發(fā)布?】 臨床報道
研究RNA的科學(xué)家常常會遇到這樣一個難題:如何在活細胞內(nèi)無法看到RNA的情況下研究RNA運動狀態(tài)?最近,波士頓大學(xué)生物學(xué)家Broude利用一項新技術(shù),首次實現(xiàn)在活細菌細胞內(nèi)觀察到RNA的運動情況。這篇研究報告發(fā)表在《Proceedings of the National Academy of Sciences》雜志上。 由于RNA相對于蛋白質(zhì)或DNA來說,有較高的流動性和不穩(wěn)定性,因此對RNA進行標記非常困難。此前,有研究人員利用綠色熒光蛋白(fluorescent protein ,GFP)對RNA進行標記,但在該過程中,某些蛋白質(zhì)也同樣被標記上GFP,而且蛋白質(zhì)上標記的GFP發(fā)出的熒光過強,使得RNA上發(fā)出的熒光輝度相對較弱。因此,研究人員認為需要通過某些方法降低背景熒光。 2007年,Broude開發(fā)出一種方法,該方法可以使細胞先不合成一個完整的蛋白質(zhì),而是將一個蛋白質(zhì)分成兩個片段,這樣兩個蛋白質(zhì)片段都是無活性的。然后修飾RNA——在RNA序列上接一個“小尾巴”,這個小尾巴能夠?qū)蓚€蛋白質(zhì)片段結(jié)合到一起,從而使形成活性蛋白質(zhì),發(fā)出明亮的綠色熒光。當?shù)鞍踪|(zhì)發(fā)出熒光是,就能說明已經(jīng)結(jié)合了RNA。 在這項新的研究中,課題組通過修改上述方法,使得該方法能夠控制RNA的合成——當RNA一出現(xiàn)在細胞內(nèi),就可對RNA進行跟蹤。研究人員對大腸桿菌利用一種高分辨率的精密的顯微鏡和監(jiān)測系統(tǒng)進行研究,觀察結(jié)果表明,RNA平均分散于整個細胞內(nèi),而這與之前關(guān)于RNA在細胞內(nèi)的定位理論剛好相悖。 研究人員還強調(diào),在細胞內(nèi),RNA呈螺旋結(jié)構(gòu),類似于形成細胞骨架的某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。
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