（廣州）為了克隆肺炎鏈球菌自溶酶(LytA)的基因序列，并進行重組表達，研究者分別提取不同臨床分離株的基因組DNA，根據已知肺炎鏈球菌野生R6株LytA基因序列設計引物，進行PCR擴增，將獲得的目的基因片段克隆入原核表達質粒，然后測序；利用生物信息學方法，對不同臨床分離株LytA基因序列進行比較分析，同時進行LytA基因的重組表達。結果從不同臨床分離株的基因組中均擴增出完整的LytA基因片段，成功構建了重組質粒pGEX-4T-1-LytA.比較不同臨床分離株LytA基因的DNA序列及推測的氨基酸序列，發現各株LytA基因序列及氨基酸序列間存在差異。通過異丙基巰基半乳糖(IPTG)誘導，LytA基因在大腸埃希菌JM109中得到高效表達，十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)結果顯示pGEX-4T-1-LytA融合蛋白相對分子質量約62 000，與理論預測一致。可見序列分析發現各分離株的LytA基因序列及氨基酸序列間存在差異，但同源性極高，推測LytA基因序列保守，可用于疫苗研發。/**/