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單細(xì)胞克隆人胚胎干細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性的鑒定

【?2006-02-24 發(fā)布?】 臨床報道  

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     (北京)為了 建立單細(xì)胞克隆人胚胎干細(xì)胞系,并對其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定。研究者 采取分離自人囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)并傳代20代的細(xì)胞,用胰酶消化將細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液,將單個細(xì)胞接種至96孔板,生長出的細(xì)胞集落用膠原酶消化傳代,采用細(xì)胞化學(xué)法和免疫熒光法檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物;采用常規(guī)G帶法分析細(xì)胞染色體核型,將細(xì)胞接種至嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠后腿肌肉內(nèi),觀察細(xì)胞多向分化潛能。結(jié)果 接種的96個細(xì)胞生長出2個細(xì)胞集落,擴增建立了2個單細(xì)胞克隆人胚胎干細(xì)胞系,穩(wěn)定增殖了12個月,傳代48代。細(xì)胞呈集落狀生長,細(xì)胞核大、核仁明顯;具有穩(wěn)定的46XX核型;細(xì)胞的堿性磷酸酶、階段特異性胚胎抗原(SSEA)4、腫瘤識別抗原(TRA)1-60、TRA-1-81等特征性細(xì)胞表面標(biāo)志物呈陽性;接種至嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠后腿肌肉內(nèi)的細(xì)胞,形成了包含神經(jīng)組織、軟骨組織、鱗狀上皮組織及柱狀上皮組織等來源于3個胚層組織細(xì)胞的畸胎瘤。可見 本研究成功建立了單細(xì)胞克隆人胚胎干細(xì)胞系,其生物學(xué)特性穩(wěn)定。 /**/
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