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抑癌基因PTEN對肝癌細胞增殖的抑制及作用機制

【?2006-05-15 發布?】 臨床報道  

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   (西安)為了探討抑癌基因PTEN對肝癌細胞增殖和細胞周期的調控作用。研究者構建野生型PTEN基因和突變型PTEN基因的真核表達載體pEGFP-WT-PTEN和pEGFP-PTEN,G129R。采用脂質體介導的基因轉染法,分別將上述載體轉染不表達PTEN蛋白的人肝細胞肝癌細胞系HHCC,經G418篩選,獲得穩定表達PTEN蛋白的細胞克隆。以流式細胞儀測定細胞周期,以Western blot法分析穩定表達PTEN蛋白的肝癌細胞內源性的磷酸化AKT表達水平,同時與未進行基因轉染和轉染空載體pEGFP-C1的HHCC細胞進行對照。結果穩定表達野生型PTEN蛋白的肝癌細胞,細胞生長受到明顯抑制,與轉染空載體的HHCC細胞比較,G1期細胞比例顯著增高,G2期和S期細胞比例顯著降低,且差異有統計學意義(P<0.05);而轉染突變型PTEN基因的HHCC細胞,與轉染空載體的HHCC細胞比較,差異無統計學意義(P>0.05)。與轉染空載體的HHCC細胞比較,穩定表達野生型PTEN蛋白的HHCC細胞,其內源性磷酸化AKT水平明顯減低;而轉染突變型PTEN基因的HHCC細胞,其AKT水平無明顯變化。可見野生型PTEN基因對肝癌細胞周期具有調控作用,而突變型PTEN 基因喪失對肝癌細胞周期的調控作用;野生型PTEN基因可能通過降低AKT的活化而實現對肝癌細胞周期的調控。/**/
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