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西羅莫司誘導人肝癌細胞株BEL-7402凋亡及其機制

【?2007-04-18 發布?】 臨床報道  

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    (廣州)為了探討西羅莫司(SRL)在體外誘導人肝癌細胞株BEL-7402的凋亡作用及其機制。研究者以不同濃度的SRL(5、10、20、30、40和50nmol/L)作用于體外培養的人肝癌細胞株BEL-7402,應用流式細胞儀檢測培養24、48和72 h時的細胞凋亡情況;Hoechst 33258熒光染色法觀察細胞凋亡時的形態學變化;Western Blot法觀察BEL-7402細胞中Caspase-3、Bcl-2、Bcl-xl和Bax基因的表達變化;采用Caspase-3試劑盒檢測Caspase-3酶的活性;JC-1染色法檢測細胞線粒體膜電位(△ψm)。結果 SRL可誘導BEL-7402細胞凋亡,并與藥物濃度和作用時間呈正相關。SRL作用BEL-7402細胞后48 h,在Hoechst 33258熒光染色圖片上可見核濃縮及核碎裂等典型的細胞凋亡特征,凋亡過程中線粒體膜電位下降及Caspase-3酶原蛋白激活,伴有Bcl-2、Bcl-x蛋白表達的降低和Bax蛋白上調。可見 SRL能使抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl表達降低,促凋亡蛋白Bax表達上調,線粒體膜電位下降,激活Caspase-3酶原蛋白,從而誘導細胞凋亡。/**/
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