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西羅莫司誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞株BEL-7402凋亡及其機(jī)制 【?2007-04-18 發(fā)布?】 臨床報道
(廣州)為了探討西羅莫司(SRL)在體外誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞株BEL-7402的凋亡作用及其機(jī)制。研究者以不同濃度的SRL(5、10、20、30、40和50nmol/L)作用于體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞株BEL-7402,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測培養(yǎng)24、48和72 h時的細(xì)胞凋亡情況;Hoechst 33258熒光染色法觀察細(xì)胞凋亡時的形態(tài)學(xué)變化;Western Blot法觀察BEL-7402細(xì)胞中Caspase-3、Bcl-2、Bcl-xl和Bax基因的表達(dá)變化;采用Caspase-3試劑盒檢測Caspase-3酶的活性;JC-1染色法檢測細(xì)胞線粒體膜電位(△ψm)。結(jié)果 SRL可誘導(dǎo)BEL-7402細(xì)胞凋亡,并與藥物濃度和作用時間呈正相關(guān)。SRL作用BEL-7402細(xì)胞后48 h,在Hoechst 33258熒光染色圖片上可見核濃縮及核碎裂等典型的細(xì)胞凋亡特征,凋亡過程中線粒體膜電位下降及Caspase-3酶原蛋白激活,伴有Bcl-2、Bcl-x蛋白表達(dá)的降低和Bax蛋白上調(diào)。可見 SRL能使抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl表達(dá)降低,促凋亡蛋白Bax表達(dá)上調(diào),線粒體膜電位下降,激活Caspase-3酶原蛋白,從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。/**/
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