(上海)為了構(gòu)建重組表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)噬菌體疫苗,并觀察其抗腫瘤效果。研究者 將雞源EGFR膜外部分的5個(gè)基因片段插入T7噬菌體表達(dá)系統(tǒng)中,EGFR蛋白以融合蛋白的形式表達(dá)在噬菌體的外殼蛋白10B上,從而構(gòu)建成噬菌體疫苗。Western blot方法檢測(cè)噬菌體殼蛋白的EGFR表達(dá),ELISA方法檢測(cè)免疫小鼠血清中抗EGFR抗體。分離免疫小鼠脾細(xì)胞,檢測(cè)淋巴細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞A431的細(xì)胞毒作用。C57BL/6J小鼠經(jīng)過(guò)4次免疫,接種Lewis肺癌細(xì)胞,記錄腫瘤的生長(zhǎng)情況,評(píng)價(jià)疫苗的抗腫瘤效果。結(jié)果 成功構(gòu)建5種雞源EGFR噬菌體疫苗REPV-C1、REPV-C2、REPV-C3、REPV-C4和REPV-C5。Western blot結(jié)果顯示,噬菌體殼蛋白上有EGFR表達(dá)。經(jīng)免疫的小鼠血清中可檢測(cè)到抗EGFR抗體。免疫后的小鼠脾細(xì)胞對(duì)EGFR受體高表達(dá)的A431細(xì)胞具有殺傷作用,效靶比為10∶1時(shí),最大殺傷率可達(dá)45.74%±7.21%。腫瘤生長(zhǎng)曲線顯示,免疫后的C57BL/6J小鼠Lewis肺癌生長(zhǎng)受到明顯抑制??梢?jiàn) 重組EGFR噬菌體疫苗具有抗腫瘤效果,利用噬菌體表達(dá)技術(shù)構(gòu)建噬菌體疫苗是一種有效的抗腫瘤方法。/**/